临床PCR检测技术-实习生讲课.pptVIP

临床PCR技术;Kary B. MullisUSA, for his invention of the polymerase chain reaction (PCR) method ;一、PCR概述;PCR的概念;PCR概述——2000至2013年发表论文1280748篇;一、PCR概述;二、实验步骤;二、实验步骤;3、细胞或组织;（二）扩增;9、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定。*** 10、低头要有勇气，抬头要有低气。**** 11、人总是珍惜为得到。***** 12、人乱于心，不宽余请。**** 13、生气是拿别人做错的事来惩罚自己。***** 14、抱最大的希望，作最大的努力。**** 15、一个人炫耀什么，说明他内心缺少什么。。***** 16、业余生活要有意义，不要越轨。*** 17、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。****;;（三）结果判读;（四）PCR的常见问题及处理措施;（三）PCR的常见问题及处理措施;酶法控制 尿嘧啶DNA糖基化酶（UNG) 短于100bp的PCR产物不能用UNG完全消除污染。 紫外线表面照射 消除试剂、加样头中的DNA污染。 对短PCR产物效果不好 以预防污染为主 良好的实验室操作 ;;;;TaqMan探针;;指数期PCR定量方程才有效;PCR曲线;起点定量与终点定量;同一个样品重复96次;起点定量的关键：CT值;CT ? 起始DNA浓度;CT值 - X0 作图;四、PCR检测的临床应用;项目;项目;（二）结果分析、报告及解释 1.定性PCR与定量PCR的比较 2.定量PCR测定的临床意义 3.定性PCR测定的临床意义 4.定性和定量测定的结果报告及解释;;琼脂糖凝胶电泳;定量PCR扩增曲线图;;某患者HBV-DNA的PCR结果动态图;3、定性测定的临床应用 诊断 用于筛检 耐药突变检测 病毒基因型检测;4.定性和定量测定的结果报告及解释; 大于107拷贝/ml，日常生活接触强传染性。 小于105拷贝/ml，日常生活接触传染性较小 但不管HBV-DNA的浓度为多少，哪怕是低于检测下限，也均会引起输血后的感染。 ; 谢 谢;9、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定。*** 10、低头要有勇气，抬头要有低气。**** 11、人总是珍惜为得到。***** 12、人乱于心，不宽余请。**** 13、生气是拿别人做错的事来惩罚自己。***** 14、抱最大的希望，作最大的努力。**** 15、一个人炫耀什么，说明他内心缺少什么。。***** 16、业余生活要有意义，不要越轨。*** 17、一个人即使已登上顶峰，也仍要自???不息。****;;9、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定。*** 10、低头要有勇气，抬头要有低气。**** 11、人总是珍惜为得到。***** 12、人乱于心，不宽余请。**** 13、生气是拿别人做错的事来惩罚自己。***** 14、抱最大的希望，作最大的努力。**** 15、一个人炫耀什么，说明他内心缺少什么。。***** 16、业余生活要有意义，不要越轨。*** 17、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。****