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17.2 基因操作的主要技术
17.2.1核酸印迹杂交技术
利用一个标记的(如用同位素标记)特异的单股DNA或
RNA片段—— 探针(probe),可以:
研究DNA之间的亲缘关系;
发现基因的缺失或突变;
测定某种遗传信息的量;
鉴定某种基因
基因治疗等
分子杂交是一系列基因鉴定方法的基础
印迹技术(Blotting)
Southern blot——用探针鉴定DNA
Northern blot——用探针鉴定RNA
原位杂交(Hybridization in situ)
指纹分析(Finger printing)
基因芯片(DNA microarray )
用探针鉴定DNA
称为Southern
印迹,鉴定RNA称
为Northern印迹
图17-2 Southern-blot印迹杂交原理示意图
17.2.2 DNA核苷酸序列分析
S
a
n
g
e
r
双
脱
氧
链
终
止
法
图17-3 双脱氧终止法DNA测序原理
17.2.3 聚合酶连式反应
(PCR, DNA polymerase chain reaction )
目的基因可以通过以下系统在试管中得以大规模扩增
一个温度和时间可以控制的反应体系
含有双链DNA模板
耐热的DNA聚合酶(如Taq酶)
一对设计适当的RNA 引物,dNTP原料,过量
经“变性退火延伸”多次循环使目的DNA得以扩增
图17-4 PCR原理示意图
17.3 核酸技术的应用和发展前景
在生命科学研究中的应用
在动物疾病诊断中的应用
在动物遗传育种中的应用
在生物制药中的应用
在农业中的应用
在人类基因组项目基本完成之后,人类蛋白质组项目
将要展开,旨在对人类基因组表达的全部蛋白质进行全
面的、高通量的、精细的分析,这是后基因组时代的新
的研究领域,对于人类认识自己,控制疾病的意义将难
以估量。
本章结束
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