薄层色谱三种展开方式.pdf

总的来讲平面色谱的展开有三种几何形式即线性、环形及向心，见图 7-3-12 。 此外，为提高分离效率及检测灵敏度进行的展开方式的改进，设计了多种相应的展 开室，现分别介绍如下。 （一）线性展开 1. 上行展开 将点样后的纸或薄层的底边置于盛有展开剂的直立型的多种规格的平底或双槽展开 室中，展开剂由纸或薄层下端借毛细管作用上升至前沿。 这种展开方式适合于含粘合剂的硬 板展开， 是薄层色谱中最常用的展开方式。 平底及双槽展开室均有三种规格， 即带不锈钢或 玻璃盖的 20cm×20cm，20cm×10cm 及 10cm×10cm 三种。见图 7-3-13 。 在使用平底展开室时，可将展开室一端垫高，使展开剂集中在薄层板点有样品的一 端，这样可以节省展开剂；如果薄层板需用展开剂饱和， 可以将薄层板放在垫高的一端，饱 和后展开时可将另一端垫高，薄层板就可以接触展开剂进行展开，见图 7-3-14 。如果需要 用与展开剂不同的溶剂蒸气 （如挥发性酸或碱等） 饱和薄层板时， 可在平底展开室中放置盛 有某种挥发性溶剂的小杯，效果也非常理想。 双底展开室的优点是节省展开剂，便于预饱和以及放置展开剂于一侧槽中，另一侧 槽内可放置另一种饱和蒸气用的溶剂， 特别是代替在展开剂中互溶程度低， 容易分层的混合 展开剂。 另一种上行展开方式是夹心式展开，由于展开室的体积大小及饱和程度影响薄层分 离而设计的，见图 7-3-15 。 将点样后的薄层板的两边垫以玻璃窄条，上面覆盖一块同样大小的玻璃盖板，并使 其稍短于薄层板 2cm，以便使展开剂浸到薄层的边缘，两片玻璃板用不锈钢夹子固定，放入 展开剂中展开，这种方式不需饱和。 小孔线形薄层技术，即将部分硅胶从薄层上除去，形成线性小孔以控制展开速度， 从而增加塔板数，改善分离状况，提高呈色灵敏度。具体作法是在距离薄层底边 1cm处，用 一头接水泵的玻璃吸管将硅胶一点一点地吸去，使呈一排圆形小孔或长圆形小孔（内径约 2mm，孔间距离约 1mm），见图 7-3-16 。用此法成功地分离了高三尖杉酯碱差向异构体。 上行展开是薄层色谱法中使用最广泛的一种展开方式，但在纸色谱法中因为需将滤 纸吊起固定， 或将滤纸卷成筒状才能进行， 操作比较复杂， 故在纸色谱法中上行法较少使用。 2. 下行展开 平面色谱法中的下行展开， 多用于纸色谱法， 图 7-3-17 为纸色谱法下行展开装置的 示意图， 将点样后的滤纸悬放在展开剂槽中， 用粗玻棒压纸以固定， 展开室底部可放饱和滤 纸用的溶剂， 展开剂从上而下流动， 下行法中展开剂除毛细管作用外还有重力作用， 因此展 速比上行法相对较快。 3. 双向展开 在正方形纸或薄层上，将样品点在一角，如图 7-3-18 的 a 处，先将纸或薄层板的 AB 一边浸入展开剂，使它沿方向Ⅰ展开一次，取出纸或薄层板，挥去展开剂，转 90°后再 将纸或薄层的 BC一边浸入另一种展开剂，沿方向Ⅱ作第二次展开，第一次及第二次展开时 的对照品分别点在 b 及 b 处。这种方法常用于成分较多、性质比较接近的难分离物质的分 离，如氨基酸的纸色谱常用双向展开，实际上此法是为了增加展距，调节展开剂的极性，从 而提高分离能力的展开方式。此法仅适用于定性。 4. 近水平展开 将适量展开剂倾入长方形的玻璃展开室中，见图 7-3-19 ，将点样后的薄 层板下端浸入展开剂 0.5cm，薄层上端垫