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检测食品基质中三聚氰胺和三聚氰酸 , NationalCenter , . , , ; , , CA 引言： 年月，北美几个宠物食品生产厂家自发的在全国发起产品回收的公告， 这一 【】 举动源于报道其产品中有一些会引起宠物肾衰竭的物质成分 ，用于生产宠物食 品的源材料是 从中国进口的小麦麸， 已经被认定是污染的源头 【】 。虽然，早期报道表明这种污染物在宠物食品中是被禁用的。但是 , 进一步调查研究发现污染有三聚氰胺的饲料已经被用于人所食用的动物喂养 【、、】 。特别是，它已经存在于鸡、猪、鲶鱼的饲料中。因此，美国和开发了动物器官中三聚氰胺残留检测方法―――强离子交换固相萃取的液湘色谱－串联质谱检测。 药品和试剂： 除了特别说明的试剂而外，所有使用的有机溶剂均为色谱纯，并购自 ( , , ) 。三聚氰胺、三聚氰酸和％（）氨水购自 (. , , ) 。所使用的内标是标 记的三聚氰胺和三聚氰酸，由氯化氢标记，也购自 (. , , ) 。?超纯水系统提供 了 Ω 的实验用水， ?超纯水系统购自 (, , ) 。 标准溶液制备： 先用 ()甲醇水分别配制 μ 的三聚氰酸、三聚氰胺溶液。分别取上述溶液，用的水乙晴进行稀释，获得终浓度为 μ的储存标准溶液。另外，分别取 μ的储存标准溶液，用乙晴进行连续稀释，获得 范围内的个标准工作溶液。取 μ内标储存标准溶液分别加入到上述 个标准工作溶液中，即为校正标准溶液。 样品制备： 固体样品放在 ?(? . , , )中高速搅拌成均匀微粒。然后加入水－甲醇抽提，取水相。加入内标准品。样品制备由非在线离子交换色谱小柱完成。 液湘色谱： 仪器： ?( , )。液湘色谱柱：粒径 μ 、内径 、长 ，分析柱温： °。最初流动相为乙晴－异丙醇－ 醋酸铵，其各组份比率为，流速为 μ。五分钟以后，流动相立即改变为的水－乙晴， 流速转换为 μ，平衡。 流动相再变回到最初的流动相，流速也换回到 μ。在最初的里， 柱子另一端的流出液接入废液，随后接在检测器上，即运行保留时间。 质谱条件－三聚氰胺 质谱： 系列质谱仪（ ） 源极：加热电喷雾离子源 () 离子化：正离子电喷雾离子源 夹套气压 ()： 1 / 6 辅助气压 ()： （ °） 离子转换管温度： ° 扫描时间： 分辨率 : 变调： 标记的三聚氰胺 三聚氰胺（内标） 条件： 碰撞能量： 反向碰撞能量（）： 质谱条件－三聚氰酸 质谱： 系列质谱仪（ ） 源极：加热电喷雾离子源 () 离子化：负离子电喷雾离子源 夹套气压 ()： 辅助气压 ()： （ °） 离子转换管温度： ° 扫描时间： 分辨率 : 变调： 标记的三聚氰酸 三聚氰酸（内标） 结果： 图是三聚氰胺、三聚氰酸、标记的三聚氰胺和三聚氰酸的标准色谱图。图、 分别为三聚氰胺、三聚氰酸浓度范围为 的标准曲线，该标准曲线在整个浓度范 围内具有较好的线性关系。同时，在图中也给出了该曲线中 区段的放大图。从 图可以看出， 在鲶鱼基质样品 （具体样品制备方法见前面所述） 谱图中有三聚氰 胺、三聚氰酸相应的尖峰，其分别为 、 。而且其他杂峰也表现较弱。可见，该 样品制备方法对摒弃杂质具有较好的效果。 另外，通过使用扫描功能收集到全 波长数据，是通过监测数据而工作的。 即当一个特殊的反应达到阈值水平时， 全 扫描功能就被激活。 图 给出了 三聚氰胺和其内标的全波长扫描结果。 全波长扫 描数据在谱库中进行搜寻，从而对谱图结果进行确认，并消除假阳性。当 鲶鱼 2 / 6 样品全扫描谱图尖峰在谱库中进行搜寻时， 谱库给出最匹配结果为三聚氰胺 （见 图）。图的左下四分之一处是样品的谱图和谱库给出的匹配标准谱图， 上面为样 品谱图，下面为谱库给出的匹配标准谱图。 从图上可以看出， 即使提供的匹配标 准谱图是使用没有基质的标准品产生的，但这两者之间仍然有很好的匹配度。 图： 的三聚氰胺、三聚氰酸和其内标物――标记的三聚氰胺和三聚氰酸的色谱图（由上至下依次为：三聚氰酸、标记的三聚氰酸、三聚氰胺、标记的三聚氰 胺） 图：三聚氰胺的标准曲线（浓度范围为 ），其中，左图给出的是 完整范围内的标准曲线，右图则是左图中 区段的放大。 3 / 6 图：三聚氰酸的标准曲线（浓度范围为 ），其中，左图给出的是 完整范围内的标准曲线，右图则是左图中 区段的放大。 图：鲶鱼基质中 三聚氰酸、三聚氰胺分析检测色谱图， 其含量分别为 、 。 4 / 6 图：左图为标记的三聚氰胺谱图，右图为三聚氰胺谱图 图： 鲶鱼基质谱图对照谱库的搜寻结果，图上可以看出三聚氰胺跟其匹配率最高。 结论： 一种专门用来对食物中三聚氰胺、 三聚氰酸进行检测并定量的方法已经被证 实，而且该方法是操作简单、灵敏度好。该方法可以用来对很多样品进行分析， 分析柱的性能也不会因此而退化。