基因工程原理-第一章绪论.ppt

基因工程原理;;基因工程原理-第一章绪论;;;《基因工程》，龙敏南 等著，科学出版社，普通高等教育“十一五”国家级规划教材;;第一章 绪论——基因工程概况;目的基因的制备 DNA重组（限制性内切酶） 运输工具——基因克隆载体 目的基因导入受体细胞 外源基因的表达;1.1.2 基因工程理论依据;1.1.3 基因工程研究的基本路线;1.1.4基因工程发展史 （1）理论上的三大发现：;基因工程原理-第一章绪论;1.1.4基因工程发展史 （1）理论上的三大发现：;基因工程原理-第一章绪论;1.1.4基因工程发展史 （1）理论上的三大发现：;基因工程原理-第一章绪论;DNA分子的体外切割与连接技术1970年，Smith等在流感嗜血杆菌中分离纯化了核酸限制性内切酶HindⅢ；1972年，EcoR Ⅰ。 DNA分子的核苷酸序列分析技术 基因工程载体pBR322和pUC13等载体。 Cohen发现质粒pSC101，并作为基因工程的载体使用.;（3）基因工程的诞生;1973年，Cohen等获得了抗四环素和新霉素的重组菌落TcrNer，标志着基因工程的诞生：;Cohen体外重组实验的意义：;1977年，E. coli中合成了人生长激素基因。 1978-1979胰岛素基因在大肠杆菌中表达。 1982年，培育出了超级鼠。 1985年Horsch发明了植物基因工程的基本方法：叶圆盘法，并获得转基因植株。 1990年，患有遗传免疫疾病的4岁女孩接受了基因疗法。 1990年，Perlak 将B.T.基因导入棉花获得抗虫棉 。 1991年，美国开始人类基因组计划。 1997年，“多利”绵羊诞生。;转移大鼠生长素基因的小鼠 ;基因工程原理-第一章绪论;1.2 基因工程研究内容;基因工程原理-第一章绪论;第一次课结束;琼脂糖凝胶电泳(0.2-50kb DNA)聚丙烯酰胺凝胶电泳(1-1000bp DNA);基因工程原理-第一章绪论;EB的工作原理：;-;原理:带有互补的特定核苷酸序列的单链DNA或RNA混合，互补区段会退火形成双链结构。;Southern Blotting杂交:;Southern印迹杂交显色图片 ;Northern Blotting杂交:1979年，J.C.Alwine等，应用于特定性状基因在mRNA水平上的动态表达研究。。;（3）细菌的转化（Transformation）;双脱氧链终止法（Sanger法）：英国生物化学家Frederick Sanger于1977年发明;;DNA Sequencing via the Sanger Method;Frederick Sanger ;化学降解法(Maxam-Gilbert法）：250bp 1977年，A.M.Maxam和W.Gilbert建立的DNA片段序列的测定方法;DNA分子末端放射性标记;DNA序列分析仪;聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR ） 1985年，美国，Mullis：体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法。成果发表在Science上。;基因工程原理-第一章绪论;基本原理： ;高温变性;基因工程原理-第一章绪论;1.4 基因克隆需要特殊的工具和技术;1.5 基因工程的意义;医药 重组药物 基因治疗 检测遗传疾病、病原 农业 抗病虫 提高品质 提高花卉的观赏价值 抗逆性 家畜：瘦肉比；饲料利用率；加快生长; 主要基因工程产品的研制、开发、上市时间;第二次课结束