动物细胞工程课件.ppt

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人们获得抗体的传统方法是? 将抗原注入动物体,然后从动物血清中提取抗体 这种方法的缺点是什么? 效率低,产量有限,纯度低,动物抗体注入人体可能产生严重的过敏反应。 运用已学知识,设想怎样获得单一类型的抗体? 能否用单个B淋巴细胞通过克隆形成的细胞群来产生单一类型的抗体呢? B淋巴细胞在体外不能无限增殖。 二:动物细胞融合的成功应用 ——单克隆抗体的制备 思考 单克隆抗体的制备—极富创造性的方案 将能够产生特定抗体的B淋巴细胞和具有无限增殖能力的骨髓瘤细胞融合在一起,形成杂交瘤细胞。杂交瘤细胞既能在体外快速生长,又能持续分泌成分单一的特异性抗体。这种单一类型的只针对某一特定抗原决定簇的抗体分子,就是单克隆抗体。 米尔斯坦(阿根廷)和科勒(德国)因此在1984年获诺贝尔奖。 杂交 细胞 灭活的病毒等手段 小鼠骨髓瘤细胞 B淋巴细胞 经免疫的小鼠 提取 杂交瘤细胞 第一次筛选 用特定的选 择性培养基 第二次筛选 能产生特定抗体、培养条件下能无限增殖的杂交瘤细胞 体外培养 注射到小鼠腹腔 提取单克隆抗体 已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径,但能不断分裂增殖,将这两种细胞在试管中混合,加聚乙二醇促融,获得杂种细胞。请回答: (1)试管中除融合的杂种细胞外,还有 种融合细胞。 (2)设计一方法(不考虑机械方法),从培养液中分离出 杂种细胞,并说原理。 方法: 。 原理: 培养液中加入氨基嘌呤,收集增殖的细胞 加入氨基嘌呤后,使D合成的途径阻断,所以仅D合成途径的骨髓瘤细胞或彼此融合的细胞就不能增殖,但杂种细胞则可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖 思考讨论:为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活?不灭活行吗? 因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂 质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合,不灭 活的话会感染细胞,而不能诱导细胞融合。 5.体细胞核移植技术存在的问题 看书P49-50页 1.动物细胞工程技术的基础是:(    )  A.动物细胞融合  B.胚胎移植  C.动物细胞培养  D.核移植 C 课堂练习; 人们获得抗体的传统方法是? 将抗原注入动物体,然后从动物血清中提取抗体 这种方法的缺点是什么? 效率低,产量有限,纯度低,动物抗体注入人体可能产生严重的过敏反应。 运用已学知识,设想怎样获得单一类型的抗体? 能否用单个B淋巴细胞通过克隆形成的细胞群来产生单一类型的抗体呢? B淋巴细胞在体外不能无限增殖。 二:动物细胞融合的成功应用 ——单克隆抗体的制备 思考 细胞融合是正常的生命活动 两个细胞正在融合 受精作用 已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径,但能不断分裂增殖,将这两种细胞在试管中混合,加聚乙二醇促融,获得杂种细胞。请回答: (1)试管中除融合的杂种细胞外,还有 种融合细胞。 (2)设计一方法(不考虑机械方法),从培养液中分离出 杂种细胞,并说原理。 方法: 。 原理: 培养液中加入氨基嘌呤,收集增殖的细胞 加入氨基嘌呤后,使D合成的途径阻断,所以仅D合成途径的骨髓瘤细胞或彼此融合的细胞就不能增殖,但杂种细胞则可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖 已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径,但能不断分裂增殖,将这两种细胞在试管中混合,加聚乙二醇促融,获得杂种细胞。请回答: (1)试管中除融合的杂种细胞外,还有 种融合细胞。 (2)设计一方法(不考虑机械方法),从培养液中分离出 杂种细胞,并说原理。 方法: 。 原理: 培养液中加入氨基嘌呤

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