细胞死亡与心衰及中医药干预.ppt

细胞死亡与心衰及中医药干预;心肌兴奋收缩耦联障碍;;缺血缺氧 氧化应激 神经内分泌失调;一、心肌细胞死亡的形式;（一）凋亡;凋亡小体;Hoechst染色--核碎裂 ;DNA电泳呈现特征性的“梯”状条带;（二）自噬;自噬的三种类型 ;巨自噬的过程 ;自噬的分子机制 ;自噬的检测;透射电镜—自噬泡;Western blot--LC3Ⅱ;免疫荧光 GFP-LC3;单丹磺酰尸胺(MDC) 染色;（三）胀亡（oncosis）;Typical appearance of different types of cell death. A, C, and E, Confocal micrographs: counterstaining for actin, red; nuclei, blue; specific fluorescence, green. B, D, and F, Electron microscopic pictures (all bars2 m). A and B, Apoptotic cell death. A, Nuclei with DNA fragmentation are green. B, Nuclei show condensed chromatin. C and D, Oncotic cell death. C, Single cell oncosis labeled with C9. D, Nuclei are electronlucent with clumped chromatin, mitochondria are damaged with flocculent densities. E and F, Autophagic cell death. E, Ubiquitin deposition and loss of nuclei. F, Ultrastructural appearance with numerous autophagic vacuoles .;自噬细胞;二、心肌细胞不同死亡形式与  心衰关系的研究进展 ;（一）心肌细胞凋亡与心力衰竭;Li A等报道，自发性高血压大鼠在向心力衰竭转变过程中，细胞凋亡的数目较非心力衰竭的自发性高血压大鼠高4倍，而较对照组的WKY鼠高17倍。 ;（二）心肌细胞自噬与心力衰竭;Autophagic vacuole in electronograph of model group（×15000）; Counting of autophagic vacules ;自噬可能损伤心肌细胞;Hongxin Z等用主动脉缩窄法建立心力衰竭的模型 心衰组中可检测到心肌细胞自噬的程度增加;（三）心肌细胞胀亡与心力衰竭;心肌细胞的胀亡在心力衰竭的过程中参与了心肌细胞进行性减少的过程。 它与凋亡和自噬等心肌细胞死亡形式一并发生。; 细胞凋亡还是胀亡，取决于细胞内有无一定量ATP 的存在，能量不能满足，凋亡无法完成其程序时， 细胞转向发生坏死样改变， 影响到胞内ATP 水平的因 素因而影响到细胞死亡方式的选择。在ATP 不足的情况 下予以补充细胞ATP 后， 细胞可转为凋亡形式的死亡。 ;;三、挽救濒死心肌、防治心肌细胞死亡在心衰防治中的作用与前景 ;（一）干预细胞死亡在防治心力衰竭中??研究进展;;Autophagic vacuole in electronograph of model group（×15000）;（二）单味中药抗心肌细胞凋亡研究进展;（三）中药复方合剂抗心肌细胞凋亡研究进展;;; ;;例如：在缺血/再灌注损伤中有大量氧自由基（O2-，OH。）生成，在此过程中，电子在更微观的世界里的运动、 分布凭借人们肉眼是无法直接查觉的，如果利用电子自旋共振技术（ESR），就可以清晰地分辨出自由基的种类、数量。  ESR  羟自由基 超氧阴离子自由基 单线态氧  ;;454bp Cu-Zn SOD;Mn SOD 基因扩增产物电泳图;线粒体膜电位的检测结果 ;线粒体膜电位的检测结果 ;线粒体膜电位的检测结果 ;线粒体膜电位的检测结果 ; 表达谱芯片双色荧光扫描 A：缺血组（Cy5）/对照组（Cy3） B：四逆汤组（Cy5）/缺血组（Cy3）红色表达高表达：绿色表示低表达,黄色表示表达水平无改变。; 基因芯片测试结果初步显示：;心肌总蛋白2-DE图谱;心肌缺血后模型组及四逆汤组蛋白表达情况;