生物燃料乙醇剖析.pptxVIP

第五章 生物燃料乙醇;5.1.1 物理性质;5.2 乙醇生产原理;提取;5.2.1 乙醇发酵微生物学; 酵母是典型的真核生物，一般具有以下五个特点： 个体一般以单细胞状态存在； 多数为出芽繁殖，也有裂殖； 能发酵糖类； 细胞壁常含有甘露聚糖； 喜在含糖量较高、酸度较大的水生环境中生长。;5.2.1.2 酵母的菌落;5.2.1.3 酵母的生长条件;（3） 溶氧。酿酒酵母是兼性厌氧菌，在有氧无氧条件下均能生长，但有氧情况下生长的更好。在有氧时靠呼吸产能，无氧时借发酵或无氧呼吸产能。所以乙醇酵母在菌种生长起始通风培养，使种子快速生长，等长至对数期快结束时停止通风，进行厌氧培养，从而使细胞进行发酵产乙醇。; 酵母在发酵麦芽糖和蔗糖为乙醇前，这两种双糖要事先被酵母的相应的酶水解成单糖。当培养条件从厌氧转换到有氧时，酵母发酵葡萄糖的能力减弱，但发酵蔗糖的能力提高1.5倍。酵母只有在培养基中没有葡萄糖和果糖时，才发酵麦芽糖。 三羧酸循环的任何中间产物（丙酮酸、柠檬酸、琥珀酸、富马酸、苹果酸）都能被酵母利用并作为唯一碳源。 （2）氮源。酿酒酵母能利用的氮有两种形式：氨类和有机氮。酵母能有效地利用硫酸铵和磷酸铵、尿素和有机酸铵盐（乙酸铵、乳酸铵、苹果酸铵和琥珀酸铵）。在培养基中有可发酵性糖类存在时，这些铵盐只作为酵母的氮源，但是氨基用完后，酸游离出来，这会引起pH改变。氨基酸既可以是酵母的氮源，;5.2.1.5 乙醇生产对酵母要求;酵用酵母，除了以上特性外，还要具备以下性能，即要耐渗透压能力强，耐酸耐温能力强，对金属特别是Cu2+的耐受性强，并且产生泡沫要少。;单宁原料中乙醇发酵能力较强，变形少，产乙醇能力也强。 （3）拉斯2号（RasseⅡ）酵母。又名德国2号酵母，细胞呈长卵形，较难形成子囊孢子。能发酵葡萄糖、蔗糖、麦芽糖，不发酵乳糖。在玉米醪中发酵特别旺盛，适用于淀粉质原料。 （4）拉斯12号（RasseⅫ）酵母。又名德国12号酵母，细胞呈圆形或近卵圆形，较易形成孢子。细胞富含肝糖，在培养条件良好时无明显的空泡。在麦芽汁培养基上形成灰白色菌落，中心凹陷，边缘呈锯齿状。能发酵葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、半乳糖和1/3棉籽糖，不发酵乳糖。; （5）K字酵母。从日本引进的菌种，细胞卵圆形，个体较小，但生长迅速。适用于高粱、大米、薯类原料生产乙醇。; 在ED途经中生成的2分子丙酮酸也是脱羧生成乙醛，乙醛还原生成乙醇。ED途径是由部分EMP、部分HMP和两个特有的酶促反应组成的，其中，两个特征性酶分别为6-磷酸葡萄糖酸脱水酶和2-酮-3-脱氧-6-磷酸葡萄糖酸醛缩酶。在末端假单胞菌中能使2分子丙酮酸脱羧，然后还原乙醛生成2分子乙醇和2分子CO2；而在其他假单胞菌中氢载体氧化后，生成1分子的乙醇、1分子乳酸和1分子CO2。 细菌乙醇发酵是20世纪70年代出现的，目前尚处于实验阶段。其特点是代谢速率快，发酵周期短，比酵母菌的乙醇产率高。该类细菌具有厌氧和耐高温的特点，能利用各种糖类。工业上用于乙醇发酵的细菌有芽孢杆菌、运动发酵单胞菌、螺旋体菌、解淀粉杆菌、明串珠菌、耐热厌氧菌和嗜热芽孢杆菌等。; 2) 工程酵母 酿酒酵母是第一个完成基因组测序的真核生物，其80%的基因功能都已经获知，遗传操作性强。因此，许多科学工作者致力于应用生物技术手段来改造酿酒酵母。; 1996年，Ho等通过将木糖还原酶（催化木糖生成木糖醇）、木糖醇脱氢酶（催化木糖醇生成木酮糖）和木酮糖激酶（催化木酮糖生成5-磷酸木酮糖）的基因通过载体转入酿酒酵母，首次成功构建可以同时利用葡萄糖和木糖生产乙醇的工程酵母。 随后又将上述3个基因的多拷贝整合到酵母染色体上，得到了稳定的工程酵母，可以在36h发酵每升含53g葡萄糖和56g木糖的混合发酵液产生50g/L乙醇。; 3）工程细菌 如前所述，细菌作为乙醇生产菌有着一定的缺陷，但是细菌广谱的底物利用能力使得它们在发酵木质纤维素水解液方面存在优势，而且它们利用戊糖的速度有时甚至同利用己糖一样快，其菌体生成量少，使得它们有较高的乙醇转化率。 运动发酵单胞菌与酵母相比产生菌体量少，其乙醇转化率高5%—10%，乙醇生产率是酵母的2.5倍，其乙醇耐受力可达120g/L，运动发酵单胞菌被认定为安全菌株。但是运动发酵单胞菌仅能利用葡萄糖、果糖和蔗糖。将木糖异构酶、木酮糖激酶、转酮酶和转醛酶引入运动发酵单胞菌，工程菌可以利用木糖产生乙醇，其乙醇转化率据报道可达86%。Mogagheghi等（2002）将木糖和阿拉伯糖代;谢所需的7个酶基