PCR体系组分最新分析和总结.pdfVIP

PCR体系组分 DNA 模板（ template ），含有需要扩增的 DNA 片断。 2 个引物（ primer ），决定了需要扩增的起始和终止位置。 DNA 聚合酶（ polymerase），复制需要扩增的区域。 脱氧核苷三磷酸（ dNTP），是指 4 种脱氧核糖核酸，用于构造新的互补 链。 缓冲体系，提供适合聚合酶行使功能的化学环境。 H2O 为了保持各个组分的浓度，在体系中加水稀释 注意： 部分品牌缓冲液不含有 Mg2+，那么还需要添加对应浓度的 Mg2+。酶请最 后加入，水请最先加入。 PCR步骤 1. DNA变性 （90℃-96℃ ）： 双链 DNA模板在热作用下，氢键断裂，形成单链 DNA。 2.退火 （25℃-65℃ ）： 系统温度降低，引物与 DNA模板结合，形成局部双链。 3.延伸 （70℃-75℃ ）： 在 Taq 酶（在