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发酵过程中噬菌体感染问题 1 噬菌体 噬菌体是侵染细菌的微生物病毒， 广泛分布于自然界中。 在生产中见到的噬菌体为蝌蚪 4 形，直径约 0.1um ，其形态在显微镜下看不见，通过电子显微镜放大 9 ×10 倍后才能看见。 故在生产中平时对噬菌体看不见摸不着，无形之中增加了对其了解和预防的难度。 2 噬菌体的主要特性 2.1 专一的寄生性。噬菌体只能在专一的宿主细胞中生长繁殖，只能在活的、处于繁殖 阶段的细胞中生长繁殖，不能脱离宿生而自行生长繁殖。如果不同菌株的亲缘关系比较近， 那么此菌株也是会感染的， 特别是针对长期生产同一产品的发酵工厂要特别注意， 在换新菌 株之前必须了解其背景。 2.2 不耐热性。游离的噬菌体在 45℃条件下 10min 就可使其失活。 2.3 不耐药性。直接在噬菌体上喷洒 1%新洁尔灭、 75%酒精、 1%双氧水、 5% 的甲醛等 都可使其失活。 3 感染噬菌体后的现象 噬菌体分烈性噬菌体和温和性噬菌体。 温和性噬菌体由于其潜在的危害性大， 有时候感 染了， 但不爆发，为以后的大面积爆发埋下了隐患。在从事发酵工作时就遇到，车间周围环 境恶化的已经相当厉害，仅一个星期中上的罐中有 75%罐都爆发了噬菌体，除了一罐以外， 且表观中基本看不出染噬菌体的现象，而电镜观察是能看到噬菌体存在的。 感染后爆发的现象有： 3.1 发酵液光密度开始上升，而后下降。但有时也不上升，当把 1% 的噬菌体人为的接 入罐中，光密度始终处于最低位 3.2 pH 逐渐上升，一般升到 7.5，不再下降 3.3 耗糖、氨缓慢或停止 3.4 OD 回升 3.5 泡沫大、料液略黏 3.6 镜检时发现菌体减少，发胖，革兰氏染色后呈现红色碎片。严重时，可出现拉丝或 网状，或呈鱼刺状，几乎看不到完整菌体。 3.7 用含有噬菌体的发酵液点在平板上能看到噬菌斑 4 噬菌体的预防 4.1 五大误区 4.1.1 精度为 0.01um 的空气过滤器能阻拦噬菌体空气。过滤器中的 0.01um 的精度不是 单指膜的精度，他是把布朗运动、撞击等拦截都计算在内的，故 0.01um 只是个相对精度， 实际上膜的绝对精度在 0.2um 左右，故 0.01um 的空气过滤器可以挡住一部分噬菌体，但不 能完全挡住。用过滤器的洗脱液经电镜观察，可以看到噬菌体的存在。 4.1.2 噬菌体不耐热， 65 ℃以上的温度可杀死噬菌体。我们所说的热灭菌是指达到一定 的温度并维持一定的时间， 使微生物致死的过程， 可在实际生产中我们经常会遇到温度达到 了使噬菌体致死的温度， 可是却杀不死噬菌体， 主要原因在于维持时间不够。 这就很容易解 释为什么空气在进罐前就已经加热到 70℃，可噬菌体仍然能活着进罐。 4.1.3 噬菌体对药物敏感。甲醛等消毒剂可杀死噬菌体原理同上，虽然药的浓度和剂量 足够，可是如果维持时间不够仍起到不杀菌效果。用 5% 的甲醛对全厂区喷洒，而后在环境 中取样测定，仍有很多活噬菌体。 4.1.4 预防噬菌体是发酵车间的事情，与其他车间无关。噬菌体的防治是要上下齐动手， 人人都参于。发酵要做好是需要各部门配合且长期坚持下去。 4.1.5 生产正常时，对噬菌体的警惕可以放松一点了。对于噬菌体的防治，我们要做到 年年防、月月防、日日防、时时防，至少每月召开一次关于噬菌体的分析会，每年召开一次 噬菌体的总结会。 4.2 预防措施 4.2.1 活菌体的排放是噬菌体发生发展的首要条件，故如何控制活菌体的排放成为