子宫颈鳞状上皮病变中HPV感染.ppt

* * * * * * * * CIN中需注意的问题 CIN病变也可表现为鳞状上皮的表面上皮显著的不典型增生，而非基底层细胞，是CINI的病理基础 CIN病变累及腺体 一般：鳞状上皮CINIII，进一步向下发展延伸至腺体，但未突破基底膜 少数：鳞状上皮CINII，腺体鳞化也呈CINII，这时为表达腺体的改变，诊断为CINII累及腺体 个别：在腺体鳞化的基础上出现不典型增生，甚至出现的不典型增生的程度超过表面鳞状上皮 绝大多数的HPV感染可回退 Spontaneous regression Spontaneous regression Cancer High-grade dysplasia Low-grade dysplasia Subclinical HPV infection US Cases 300,000 11,000 1,400,000 30,000,000 HPV infection Cervical Cancer Spontaneous regression 持续性HPV感染导致CIN2-3 LSIL 一般由瞬间HPV感染引起 HSIL 发生在那些持续性HR-HPV感染2年以上的患者 大多数年轻的女性(30 yrs)的HPV感染为暂时性的，将被自体免疫系统清除 HPV持续性感染一般发生在老年女性 HPV感染与机体免疫反应 阴道分泌物的粘液抗微生物多肽，抗体，酸性环境及锌离子等组成第一道防线 子宫颈鳞状上皮（复层上皮）形成天然屏障，组成第二道防线 内在的非特异性免疫防御系统即炎症反应，构成第三道防线 局部的细胞免疫监视，可启动接触性级连反应，放大传递信号，形成针对壳蛋白L1的特异性细胞免疫反应 大多数的HPV感染细胞将成为HPVL1抗原递呈细胞；细胞毒T淋巴细胞和辅助T淋巴细胞可识别此细胞，并通过免疫监视和免疫清除杀灭细胞 CytoReact 用敏感的非同位素核酸杂交和免疫组织化学及免疫细胞化学的方法检测子宫颈细胞中HPV L1 蛋白的存在，可用于细胞学涂片，组织学切片的检测。 广谱的HPV L1抗体可识别大多数的HPV L1蛋白（ 6, 11, 16, 18, 31, 33, 42, 51, 52, 56，58）。 基本原理特点 多聚物微球结合非同位素标记HPVL1DNA探针与多聚酶混合物（固态杂交液） 解链及杂交过程与抗原修复过程合并 标记物为碱性磷酸酶，底物为AEC 原为杂交与免疫组化反应颜色重叠，提高敏感性20-30倍 可检测出0.01pgHPV L1蛋白 细胞核阳性表达（核膜及核） HPV L1的存在表明HPV病毒感染处于游离状态或瞬时感染期 HPV L1阳性与异常细胞学的回退密切相关 在 HPV(+) 的病人中，HPV L1的缺失，提示存在HPV的持续感染，并有向高级别CIN发展的趋势 特别有意义的是，在HR-HPV(+)的病人中，HPV L1阳性提示HPV以游离状态存在，发生高级别CIN的机率极低 HPV L1检测的临床意义 p16检测的意义 p16是cyclin依赖性激酶抑制剂，抑癌基因，可抑制CDK4、CDK6活性，降低RB的磷酸化，增强RB的功能，抑制E2F-1的释放，从而抑制细胞周期 E7结合RB，释放E2F-1，促使细胞周期 E2F-1的聚集（RB的磷酸化的结果）导致p16的增加 p16的高表达提示HPVE7的存在 小 结 CIN的发生及发展与HPV的感染直接相关 HPV ≠ CIN CIN = HPV CIN分为：CIN I、II、III；TBS：Ascus, LSIL，HSIL 临床常用的HPV检测方法（HC-II，导流杂交） 阴道小环境的HPV感染状况 间接代表子宫颈HPV感染状况 不知HPV的生物学存在状况 生物传感仪检测子宫颈组织和细胞中的HPV类型 TERC基因扩增表明细胞的增殖活性增强，提示病变向恶性发展的原动力存在 p16的检测可提示HR-HPV感染，并整合宿主DNA 子宫颈组织和细胞中HPV L1检测阳性，提示机体免疫可清除HPV病毒感染细胞，使CIN病变向良性发展 液基薄层细胞制片技术 真空负压吸引，膜式采集技术 重力沉降技术 离心沉降技术 其他 特点： 标本保存时间长，更完整，结构更清晰 细胞数量更多 细胞平铺，不重叠 更利于观察，不易漏观察 可重复制片 应用范围： 子宫颈细胞学检查 体液细胞学检查（胸腔积液、腹腔积液、尿液、脑脊液及灌洗液等） 分泌物细胞学检查（痰液） 优势： 明显提高阳性细胞检出率 前提： 具备丰富诊断经验的病理医师是关键 国外细胞学医师需要获得医师资格证、病理医师资格证以后，再经过2-3年的专科培训才能从事细胞学诊断，并担负相应法律责任 国内正在规范，从事细胞学诊断必须有医师资格证并注册到病理诊断 1988年，美