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实验二 改良的微量凯氏定氮法测定血清蛋白质含量;前 言;由实验题目引发的思考;1.学习微量凯氏定氮法的原理。 2.掌握721型分光光度计的使用。; 蛋白质是机体内主要的含氮化合物，血清中含有蛋白质，也含有少量的非蛋白质含氮化合物。 根据蛋白质中氮元素含量相当恒定（一般平均为16％）这一特点即可得到血清蛋白质含量。; ;血清总含氮量;血清中 非蛋白氮;1、无蛋白滤液的制备;2、稀释血清的制备(由教师准备，学生无需操作);3、消化;4、显色 ;计算公式： (1)每100ml血清总含氮量:（单位：g N/100ml） C测=A测/A标×C标×稀释倍数 (2)每100ml血清非蛋白含氮量：（单位：g N/100ml） CNPN=ANPN/A标×C标×稀释倍数 (3)每100ml血清蛋白含氮量：（单位：g N/100ml） Cpro= C测 － CNPN (4) 血清蛋白质含量： （单位：g/100ml） Cpro×6.25 ;1、各样品管加液顺序为：横向依次加入，每加 一种试剂均需要充分混匀； 2、避免试剂交叉污染； 3、加热消化时试管管口不能对着自己或他人； 4、回收玻璃珠；;1、过滤无蛋白滤液前，滤纸是否可以预先湿润？为什么要制备无蛋白滤液？ 2、无蛋白滤液如果不是无色透明，说明可能存在什么问题？ 3、稀释血清及无蛋白滤液消化显色后所测的含氮量有何区别？ 4、除采用微量凯氏定氮法测定蛋白质含量以外？还可以利用哪些方法测定其含量，分别利用了蛋白质的什么性质。能否举出一、两种方法？;实验三 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳;补 充 内 容;一、微量凯氏定氮法测定蛋白质;二、双缩脲法（ Biuret法）;三、Folin-酚试剂法(Lowry法)测定蛋白质浓度;四、紫外分光光度法测定蛋白质浓度 ;五、考马斯亮蓝染色法测定蛋白质浓度 ;六、 BCA（Bicinchoninic acid，二辛可宁酸、二羧基二喹啉）;BCA的优点