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牛多杀性巴氏杆菌病病原的分离与鉴定 牛多杀性巴氏杆菌病病原的分离与鉴定 JTCVM 2021年第3期 耐药性和错过治疗时机[3,4]。社,1992,25～261 [3]李　峰.波尔山羊羔羊大肠杆菌病的诊治[J].中国兽医 [1]蔡宝祥.家畜传染病学(第四版)[M]1北京:中国农业 科技,2000,30(4):37～381 出版社,2001,46～49. [4]李梦元.规模化养猪场大肠杆菌的耐药性监测及血清流 [2]曹澍泽.兽医微生物与免疫学技术[M].北京:农业出版 行病学调查[J].中国兽医学报,2021,24(1):16～181 牛多杀性巴氏杆菌病病原的分离与鉴定 (11青海大学农牧学院,青海西宁　810003;21湟源县农牧局) 中图分类号:S855.12 文献标识码:A　　文章编号:1000-6354(2021)03-0035-02 牛多杀性巴氏杆菌病,又称“牛出败”,全称“牛出血性啉)、CMP(氯霉素)、CRO(头孢三嗪)、CTD(头孢他啶)、CTX 败血病”,是由多杀性巴氏杆菌引起的一种以高热和败血症(头孢噻肟)、ERY(红霉素)、GEN(庆大霉素)、KAN(卡那霉 为特征的急性传染病 。2021年10月初,湟源县某牛场的素)、NI(呋喃妥因)、NOR(氟哌酸)、OXA(苯唑青霉素)、STR 牦牛、犏牛等突然发病、死亡,前后共发病7头,发病率为 (链霉素)、PIP(氧哌嗪青霉素)、RIF(利福平)、SXT(复合磺 0187%(7/801);死亡7头,致死率为100%(7/7)。其临床胺)、TET(四环素)、TOB(妥布霉素)、VAN(万古霉素)等23症状:病初体温高达41～42℃,精神沉郁, 种,批号 减退或废绝,呼吸加快,有痛苦性干咳,流涎,肌肉震颤,腹1.2　方法 痛,下痢,粪便初为粥状,后为液状,间或杂有黏液、黏膜碎片1.2.1　病原菌检查　病料进行触片,分别进行革兰氏染色、 及血液,气味恶臭;随着病情的发展在颈部、咽喉部及胸前的美兰染色、镜检。 皮下结缔组织出现弥漫性炎性水肿,可视黏膜发绀;肺部听1.2.2诊有支气管音及水泡音　细菌分离培养　将病料分别无菌接种到5%犊牛血 ,有的听到胸腹摩擦音。病理变化:清营养肉汤、血清琼脂平板、普通琼脂平板、鲜血琼脂平板, 脾有小点出血;肝肿胀,质脆,个别牛肝表面有坏死灶;肾稍肿;淋巴结明显水肿;肺脏表面有肝变区,呈大理石样花纹,37℃培养18～24h,并进行细菌的纯化培养。 有纤维素性胸膜炎变化;心冠脂肪、心内外膜出血明显,心包1.2.3　生化试验　钩取纯培养物无菌接种于上述各种生化 积水;咽喉、颈、四肢等部皮下有浆液性浸润,切开流出深黄试验培养基中,37℃培养24～48h。 色透明的液体,间或杂有血液,咽周围组织和会咽软骨韧带1.2.4　动物试验　将纯培养物制成菌悬液给2只小白鼠腹 呈黄色胶样浸润,上呼吸道黏膜卡他性潮红。笔者于2021腔注射,0.2ml/只。 年10月初对其进行实验室检查,确诊为牛多杀性巴氏杆菌1.2.5　药敏试验　将纯化好的细菌用灭菌生理盐水洗下, 病,并采取了相应的预防措施,再无新病例发生,现将结果报并且与麦氏比浊管比浊,选取112×109个活菌/ml浓度的 菌悬液,用灭菌棉拭子均匀涂布鲜血清琼脂平板,经室温干1　材料与方法燥3～5min后,分别贴上各种药敏纸片,每块平板贴3片, 37℃培养18～24h判定结果,判定标准参照美国实验室标 1.1.1　病料　无菌采取牛心、肝、脾、肺、肾等脏器7份,置准委员会(NCCLS)药敏纸片扩散法法规。 4℃冰箱,待检。 2　结果1.1.2　培养基　5%犊牛血清营养肉汤、血清琼脂平板、普 2.1　病原菌检查 通琼脂平板、鲜血琼脂平板、各种生化试验培养基均由动物取肝、脾、肾等病料触片,革兰氏染色镜检,观察到革兰氏医学系传染病实验室自制。 阴性小杆菌;美兰染色镜检,观察到大量两极浓染的小杆菌。 1.1.3　实验动物　健康昆明系小白鼠2只(16～18g),均 2.2　菌落形态与培养特性 购于青海兽医生物制药厂。 血清肉汤培养24h后轻度浑浊,连续培养4～6d,有菌1.1.4　药敏试验　购自上海伊华医学科技有限公司,抗菌 膜产生,液体清彻,管底有粘稠液体;在普通琼脂平板上生长素种类为AKN(丁胺卡那)、AMP(氨苄青霉素)