透明质酸稳定性考察.pdfVIP

透明质酸的稳定性考察 郭凤仙 郭学平 李国民 透明质酸（ Hyaluronic Acid ，简称 HA ）是 1934 年 Mayer 发现并命名的。 国内外对 HA 的性质、生物活性、生产工艺、临床应用等方面都进行了广泛深 入的研究，目前主要应用于医药和化妆品方面。 HA 是由糖苷键相连接的氨基 葡萄糖和葡萄糖醛酸的双糖单位重复连接组成的直链聚合物，羧基上的负电 荷和较长的可折叠分子链使得分子空间伸展特别大， 因此 HA 溶液具有较高的 黏度 [1] ，分子量越大，黏度越高。 HA 分子链降解后，主要表现为黏度下降。 本实验通过改变 HA 存放时的温度、酸碱度和离子强度，定期测其运动黏度， 对 HA 的稳定性进行了考察。 1 材料与方法 1.1 仪器与试剂 恒温水浴（± 0.1 C ）；平氏黏度计（毛细管内径为 1.0mm ±0.05mm ）；电 热恒温培养箱；电热恒温干燥箱 ；pH 计。 HA ，山东福瑞达生物化工有限公司生产，批号 ； 0.1mol/L NaOH 、0.1mol/L HCl 。 1.2 方法 1.2.1 HA 运动黏度的测定 [2] 精密称取按干品计算的 HA 粉末 0.1g 于 100ml 容量瓶中，用蒸馏水溶解 定容至刻度，在 25 C 恒温水浴中，测定其在平氏黏度计中的流出时间（ s）， 与该黏度计的黏度计常数（ mm2/s2 ）相乘，即得 HA 的运动黏度，以 mm2/s 为单位。 1.2.2 温度对 HA 稳定性的影响 1.2.2.1 温度对固体 HA 稳定性的影响 将 HA 配成 0.1%(g/ ml) 的水溶液，测其运动黏度，作为初始黏度。分别 称取 HA 固体粉末约 1g 于容量瓶中， 置 4 C、28 C 、40 C、60 C、80 C 、100 C 下恒温保存。一定时间后分别取出，配成 0.1% 的水溶液，测定运动黏度。 1.2.2.2 温度对 HA 溶液稳定性的影响 将 HA 固体粉末用蒸馏水溶解，配成 0.1% 的溶液，分装于容量瓶内，在 上述温度下恒温保存，定时取样测定运动黏度，方法同上。 1.2.3 酸碱度对 HA 溶液稳定性的影响 取 HA 固体粉末 1.25g，用 0.9% 的 NaCl 配成 0.25%HA 溶液 500ml, 调 pH 为 7 ，测其运动黏度 ,作为初始黏度。再将 HA 溶液分装于 5 个烧杯内，分别 用移液管滴加 NaOH 或 HCl 试剂，使溶液 pH 值分别为 5 、6、7、8 、9 。五个 烧杯于 80 C 下恒温保存 12h 后取出 ,分别调 pH 值为 7.0，补加 0.9% 的 NaCl 或蒸馏水使 NaCl 浓度及 HA 浓度相同，测其运动黏度。 1.2.4 离子强度对 HA 溶液运动黏度的影响 取 1g HA 固体粉末配成 0.2% 的溶液 500ml ，再分别配制 4 、3、2、1、0.4 、 0.2mol/L 的 NaCl 溶液各 50 ml 。量取 HA 溶液 50ml 6 份分别加入上述 6 种盐 溶液混匀。然后分别测其运动黏度（ 0.1%HA 水溶液运动黏度为空白黏度）