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线粒体肌病及脑肌病 线粒体肌病及脑肌病 线粒体肌病及脑肌病 自L uft 等于1962年首次采用改良Gom o ri T rich rom e 染色(M GT ) 发现肌纤维中有不整红边纤维(RR F ) 并诊断首例线粒体肌病以来, 继而发现此类线粒体疾病也可同时累及中枢神经系统, 并引起多种线粒体脑肌病的临床综合征[1, 2], 近年来随着分子细胞生物学技术的发展, 国外的研究, 已不仅是应用光镜和电子显微镜或组织化学和免疫组化进行结构观察, 而是应用分子生物学技术在基因水平上进行探索, 并在本病的发病机理方面取得了显著的成就。如发现Kearn s 2Sayre 综合征(KSS ) 是由于线粒体DNA (m tDNA ) 缺失(deleti on ) , 线粒体脑肌病伴乳酸中毒和中风样发作(M ELA S ) 患者是由于线粒体DNA (m tDNA ) 中tRNA 亮氨酸基因的核苷酸3243位点发生A →G 碱基置换突变等[3]。国内林世和等[4]于1987年报道1例线粒体性脑肌病, 陈清棠等[5]于1988年报道一组国人线粒体肌病和脑肌病, 并于1994年再次对所收集的53例作了研究[6]。迄今国内对线粒体肌病和脑肌病的报道陆续增多[7～14], 其诊断主要靠肌肉活检组织化学M GT 染色发现不整红边纤维(RR F ) 及电镜观察。其中较深入的研究有采用聚合酶链反应(PCR ) 技术发现m tDNA 部分缺失, 缺失范围在310～717Kb [13], 线粒体最大呼吸速度及呼吸链酶复合物活性降低[14]等。陈清棠等采用Sou thern 杂交技术及PCR 对2例慢性进行性外眼肌麻痹(CPEO ) 加以研究, 证实1例m tD 2NA 有杂合缺失, 另1例经DNA 测序证实m tDNA 10909位点产生一个新的Pvu 酶切位点, 且由单个碱基置换, 认为是一新的点突变。宋东林等采用蛋白A 胶体金法(PGA ) 标记及免疫电镜观察, 发现肌肉组织中与线粒体酶复合体 、 、 及 结合的金粒子, 其程度减少, 提示线粒体内呼吸链中的酶复合体活性降低, 这些研究不论从方法学或所获结果均取得进展。 从目前国内外对本病的研究结果来看, 多认为本病是在线粒体上有着各种不同的功能异常, 并由此导致临床表现各异。这主要是由于线粒体本身的结构和功能有其特殊性和复杂性所致。对线粒体的认识[15]已有百年的历史, 直到本世纪50年代才利用电镜对线粒体的内部结构作了细微的描述。线粒体是广泛存在于真核细胞中的一种微小膜围细胞器。线粒体在细胞质中可以自由移动, 并在代谢旺盛的部位比较集中, 其空间结构由外膜、内膜、外室及内室(基质) 四部分组成。基质中含DNA 称线粒体DNA , 另有核糖体贮存钙离子。已知在线粒体不同结构部位含有不同的酶系统, 如外膜含有细胞色素C 还原酶(NADH ) 、脂肪酸辅酶A 连接酶及单胺氧化酶; 外室中含腺苷酸激酶和核苷二磷酸激酶; 内膜含氧化磷酸化系统的酶类和呼吸链(即电子传递系统) 。氧化磷酸化要有电子传递。氧化磷酸化系统的酶类包括三磷酸腺苷(A T P ) 合成酶、琥珀酸脱氢酶。呼吸链由黄素蛋白、铁硫蛋白、辅酶Q 和细胞色素所组成。此外, 内膜还含有肉毒碱脂肪酸酰基转移酶。在基质中含有柠檬酸循环酶、脂肪酸氧化酶、谷氨酸脱氢酶以及合成DNA 及RNA 的蛋白质结构成分。由此可见, 线粒体的功能与细胞内三羧酸循环、氧化磷酸化及脂肪酸氧化, 即糖、脂类及蛋白质的生化代谢有着密切的关系。但线粒体最重要的功能是进行氧化磷酸化, 产生高能磷酸键(A T P ) 。即通过在基质中进行的糖酵解、三羧酸循环以及在内膜上的呼吸链和氧化磷酸化系统的有密切偶联, 而合成大 作者单位:250012济南, 山东医科大学附属医院神经内科 ?260?量的A T P , 并依靠腺苷转移酶等作用将合成的A T P 分子输送到线粒体外。上述这些生化步骤是密切配合进行的。此外, 人类基质中的m tDNA 也是一种遗传物质, 它含有细胞色素、A T P 合成酶和所需核蛋白体核糖核酸(rRNA ) 及转移核糖核酸(tRNA ) 编码基因, 但其复制所需的聚合物酶要由核DNA (nDNA ) 编码所控制。线粒体的生长和增殖要受线粒体基因组和核基因组两套遗传系统共同控制。正是由于线粒体的结构和功能非常复杂, 所以, 线粒体疾病在发病机理方面的“异源性”和临床表现多样性则不难理解。近年Jack son 等[16](1995) 分析51例线粒体肌病和脑肌病, 其临床表现同为一种综合征或同属线粒体肌病的临床表现, 但生化分析及分子生物学水平上的研究揭示患者在线粒体上的缺陷可以不尽相同。由此可见, 目前要为线粒体肌病和脑肌病