丝状真菌的遗传分析.pptxVIP

第十章 丝状真菌的遗传 ;担子菌;毛霉属（Mucor） 根霉属（Rhizopus） 曲霉属（Aspergillus） 青霉属（Pericillium） 木霉属（Trichoderma）等 ;真菌是在细胞结构和遗传体制上具有特殊性的真核微生物 1. 它们具有类似于高等动植物的细胞核和染色体结构，可进行有性生殖 2. 具有微生物的生长迅速、生活周期短、便于培养等优点 因此，丝状真菌，尤其是粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)和构巢曲霉(Aspergillus nidulans)一直是研究真核生物遗传重组、基因结构和基因表达调节的模式系统。;第一节 微生物的生活史;什么是不完全菌？;双倍体细胞♀;单倍体细胞;1. 高等动植物以双倍体为主，细菌以单倍体为主，不完全菌介于二者之间，但更接近于细菌。 2. 高等动植物的双倍体细胞一再分裂的结果形成个体，细菌的单倍体分裂形成无性繁殖系，不完全菌也是多细胞，但更接近于细菌。 3. 异核体在高等动植物和细菌中都暂时存在，而在不完全菌中单倍体、双倍体或异核体都能形成无性繁殖系。 4. 就性的分化而言，细菌和不完全菌没有性细胞和体细胞之分，这和高等动植物有明显的区别。在微生物中除产生有性孢子的种类之外，细菌和不完全菌的双倍体世代和单倍体世代的细胞没有明显的形态和生理区别。;粗糙脉孢菌的顺序排列四分体;菌丝a;减数分裂的产物在一个子囊内形成顺序排列的四分体，是粗糙脉孢菌有性杂交的特点。对顺序排列的四分体可以进行如下的遗传分析： ①判断第一次分裂分离和第二次分裂分离 ②计算着丝粒距离 ③计算重组频率 ;1. 第一次分裂分离和第二次分裂分离 ;第一次减数分裂;I型和Ⅱ型：第一次分裂分离 Ⅲ型、Ⅳ型、V型、Ⅵ型：第二次分裂分离 ;2.着丝粒距离 粗糙脉孢菌中8个子囊孢子的排列方式可反映基因分离的方式以及基因与着丝粒之间是否有染色体交换发生。 经典遗传学研究巳证明，染色体上两个位点之间的距离越远，则这两位点之间发生交换的频率也就越高。;粗糙脉孢菌的接合型基因的着丝粒距离的测定：;3. 着丝粒距离和重组频率 用重组频率来表示基因之间遗传距离。 两个基因之间的重组距离是这两个基因与着丝粒距离之和或??差。 可以进行粗糙脉孢菌的连锁群分析。;真菌的准性生殖是指异核体真菌菌丝细胞（体细胞）中2个遗传物质不同的细胞核结合成杂合二倍体的细胞核，这种二倍体细胞核在有丝分裂过程中可以发生染色体交换和单倍体化，最后形成遗传物质重组的单倍体的过程。 ;准性生殖和有性生殖的主要区别：;当带有不同遗传性状的两个单倍体细胞或菌丝相互融合时，会导致在一个细胞或菌丝中并存有两种或两种以上不同遗传型的细胞核，这样的细胞或菌丝就叫异核体。 异核体的形成是进行准性生殖的第一步。;构巢曲霉A接合型(leu- met+)突变株与A接合型 (leu+ met-)突变株;(1)异核体的证实：将两个营养缺陷型菌株混合培养，出现原养型菌落的原因可能是由于互养、异核体、二倍体或单倍重组体的存在。 a.互养的排除： 将原养型菌落上取下的少量菌丝接种于养料贫乏的培养基上。在放大镜下将从接种处向外长出的菌丝的尖端连同小块培养基切下，放在基本培养基上。 b.二倍体或单倍体的排除： 将leu- met+株和 leu+ met-株的分生孢子混合接种在基本培养基上，取出其上长出的菌落的单个菌丝尖端，接种于基本培养基上，得到由单个菌丝尖端所长成的培养物。;(2)异核体的生物学意义： 异核体包含着不同基因型的细胞核： 具有生长优势 具有更好的环境适应能力 此外，异核体在遗传分析中也很重要，由于异核体内的两个不同营养缺陷型的细胞具有互补作用，因此可以用异核体进行基因等位性的测定等研究。 异核体的形成与A、a接合型之间没有关系，但接合型可影响形成异核体的难易程度，相同接合型的菌株间更容易形成异核体。异核体是由基因型决定的，在粗糙脉孢菌中已发现至少有10个基因与异核体的形成有关。;2. 杂合二倍体的形成;核融合：是指两个单倍体核融合形成一个二倍体核的现象。基因型相同的核融合形成纯合二倍体，基因型不同的核融合形成杂合二倍体。 异核体中两个基因型不同的细胞核以极低频率(10-7～10-5) 融合成杂合二倍体。 某些理化因素(如紫外线、樟脑蒸气或高温)处理，可提高杂合二倍体产生的频率。原因可能是由于在处理过程中使某些抑制核融合的基因发生突变的结果。;大小：构巢曲霉、黑曲霉等的二倍体分生孢子大于单倍体的分生孢子 数量：酱油曲霉中，尽管分生孢子的大小是一样的，但每个分生孢子中染色体的数目不同，二倍体分生孢子中DNA含量约为单倍体分生孢子的一倍。 根据杂合体细胞二倍体的特性，不难将它们与异核体菌落及回复突变产生