硝化菌生产工艺.docVIP

研发中心 研发中心 PAGE 4 硝化菌工艺 --初步方案 目的 为规范硝化菌工艺的生产操作，建立标准的操作规程。 范围 适用于硝化菌的生产操作。 职责 操作员、生产主管对本规程负责。 程序 4.1准备步骤 4.1.1 将发酵罐彻底清洗，确保罐内的卫生干净，若长时间未使用，需用4‰的磷酸浸泡，中和后排放，并用工艺水洗干净。 4.1.2 检查各个原辅料是否备齐，是否符合投料要求。 CO2钢瓶检查是否漏气，即气嘴周围用水试验，观察是否有气泡，如有气泡则为漏气； 氨水检查液体颜色是否有变黄、变红、变黑等现象，正常的氨水的颜色为白色透明， 检查各个阀门、水泵等是否处于关闭状态，是否可以正常使用。 向发酵罐中加入适量的工艺水，同时校正pH和DO电极。 pH校正：两点校正，以6.86为零点，以4.01为斜率校正。 DO校正：两点校正，以浸泡在饱和的Na2SO3（亚硫酸钠）中为零点标定，以暴露在空气中为100% 4.2配料（以1000L为例） 配 料 原 料 名 称 设 定 值 备注 投 料 前 加 水 （kg） 900 ±0.5% 50X 发酵介质 （kg） 28 25-30 氨水 （L） 0.2-1 使其NH4-N浓度达到50-100ppm 亚硝酸钠 （kg） 0.4-0.8 使其NO2-N浓度达到100-200ppm pH 7.8 7.6-8.0 以上配料用水均为工艺水（即处理过的水） 最后加水定容至1000L的刻度水平上，其中误差±0.5%。 a)发酵介质-1000X（终体积100L） 名称 数量 盐酸 1.0 L (±0.1L) 硼酸 284g (±5g) 四水氯化锰 176g(±5g) 二水钼酸钠 40g(±2g) 七水硫酸锌 20g(±1g) 五水硫酸铜 8g(±0.5g) 六水氯化钴 4g(±0.5g) 先在100L桶中加入60-80L工艺水； 按列表顺序加入个组分； 将盐酸缓慢加入水中并不断搅拌； 停搅拌后定容至100L (±5L)。 b)发酵介质－５０X(终体积1000L)(微量元素) 名称 数量 盐酸 10L(±0.2L) 六水氯化铁 783g(±10g) 三水磷酸氢二钾 6682g(±10g) 七水硫酸镁 3822g(±10g) 二水氯化钙 1835g(±10g) １０００X介质 50L(±０.2L) 先在1000L桶中加入500-700L工艺水； 按列表顺序加入个组分，（配料必须按此顺序依次加入物料，否则会造成大量的沉淀），再将盐酸缓慢加入水中并不断搅拌；停搅拌后定容至1000L(±5L)； c）准备50% K2CO3 溶液（以500L罐为例） 名称 数量 碳酸钾 250Kg(+/-15Kg) 首先只要加水150L左右，然后在加入碳酸钾固体，充分搅拌后再定容至500L。 碳酸钾溶解度：20℃ 109g/100ml；（物料/水） 30℃ 114g/100ml （物料/水） 4.3 参数控制 发 酵 培 养 发 酵 时 间 培 养 时 间 （小 时） 批次发酵（随工艺而定） 大致一个月为一周期 温 度 培 时 ( 小 时) 设 定 值 允 许 范 围 批次发酵（随工艺而定） 25℃ ±1?C 溶氧 培 时 ( 小 时) 设 定 值 允 许 范 围 批次发酵（随工艺而定） 45% ±15% 搅 拌 培 时 ( 小 时) 设 定 值(rpm) 批次发酵（随工艺而定） 45rpm 4.4 生产操作 4.4.1 备齐物料（发酵介质，氨水，CO2, 水） 4.4.2 调试各个控制元件（方便连续流加） 4.4.3 操作具体步骤 4.4.3.1发酵罐中加入一定量水后，再依次加入发酵介质和亚硝酸钠，氨水，并用HCl ，CO2或者NaOH调整pH至7.6-8.0,打开空压机、冻干机及相关管路，待温度冷却至25℃后接入菌种，按2%的接种量，接种的菌种要留存少量样品用来检测菌种的活性。 4.4.3.2 CO2（80L/hr）和碳酸钾（160ml/min）从起始便开始流加。 4.4.3.3 罐内只补加二氧化碳和碳酸钾，pH设定在7.45-7.75之间波动，控制范围在7.40-8.00之间，根据pH的波动控制流加量。（第一步） 4.4.3.4 每隔4hr取样检测NH4-N和NO2-N的值。 4.4.3.5 当NH4-N和NO2-N下降到50ppm以下开始流加氨水。（第二步启动条件） 4.4.3.6 第二步开始补加二氧化碳，碳酸钾和氨水，pH设定在7.45-7.75之间波动，控制范围在7.40-8.00之间，根据pH的波动控制流加量。 4.4.3.5 当SV10 达到12%以上