人造海水的配方.pdfVIP

人造海水的配方 * （引自Chemical Oceanography ,Second Edition , Millero F J,1996） * ：水＆化合物的总重量为 1kg. -3 名称 质量（× 10 kg ） 氯化钠 23.98 氯化镁 5.029 硫酸钠 4.01 氯化钙 1.14 氯化钾 0.699 重碳酸钠 0.172 溴化钾 0.100 硼酸 0.0254 氯化锶 0.0143 氟化钠 0.0029 《海洋微生物及其代谢产物》 - 林永成主编 2003 细菌的分离： 牛肉膏蛋白胨琼脂、 营养琼脂等是分离细菌的常用培养基， 前苏联细菌学家设计 的 ZOBELL 2216E 培养基是培养好气性异养细菌较好的培养基，可培养多种细 菌，SIMIDU 培养基也常用于海洋好气性异养细菌的分离， PFENNIGS 培养基适 用于海洋光合细菌的分离，分离海洋弧菌可采用 TCBS 培养基，培养基 PH 一般 为 7.2-7.6, 盐度为 28 到 30, 培养温度 28 到 37， 培养时间 1 到 7 天，注意观察 平板菌落变化， 1 到 2 天先挑取大菌落， 5 到 7 天后再挑取小菌落，为防止真菌 的污染，常在培养基中添加一定的抗真菌抗生素，如制霉菌素、两性霉素、放线 菌酮等。放线菌因生长缓慢且菌落不大，一般不会对细菌的分离产生影响。 放线菌的分离： 1 放线菌是数量最多、最常分离到的 G+，JENSEN的研究表明，离海岸越近，在 0 到 1 米水深的底泥样本中， 链霉菌占分离的放线菌总数的 86%，小单孢菌占 12%， 其他占 2%。 2 分离培养基 多采用合成培养基 （高氏合成一号、精氨酸、天门冬素培养基） 和有机培养基 （HV、 YE、WAKSMAN、bennett ）, 高氏合成一号是分离的常用培养基，适合尤其是链霉 菌的生长，但细菌和真菌也大量生长。 HV是以腐植酸为唯一碳、氮源的培养基， 对小单孢菌、小双孢菌、指孢囊菌、链孢囊菌的选择性高，但是生长的放线菌形 态不完整，难以观察，给挑菌工作带来困难。 3 抑制剂 放线菌酮、制霉菌素可抑制真菌，青霉素、链霉素可抑制细菌，重铬酸钾对真菌 和细菌均可抑制， 0 ·005%-0·01%是较理想的分离抑制剂，有三个特点：抑制细 菌和真菌的生长，不影响放线菌的正常生长，还可促进一些放线菌孢子的萌发， 价格低廉。 4 样品预处理 120 干热处理样品 1 小时能大大减少细菌和链霉菌的数量， 而对稀有放线菌影响 较少，甚至能利于孢子萌发，由于海洋样品多潮湿，同时孢子对湿热敏感，故采 用 50 到 55 度的热处理会促使大部分孢子萌发。 化学杀菌剂法 杀菌剂 苯酚 SDS 葡萄糖酸洗必泰 CG 苄索氯氨 BC 碳酸钙 氯化钙 富集的放线菌 非链霉菌属 小单孢菌