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实验7.7氨茶碱的血药浓度测定及药动学研究;【目的】
学习氨茶碱血药浓度的紫外测定方法,验证其药动学模型。
【原理】
1.氨茶碱为临床常用平喘药,由茶碱与乙二胺缩合而成。在酸性条件下,可用有机溶剂从血清中提取出茶碱,再用碱液将茶碱从有机溶剂中提出。测量λ274和λ298处的吸光度(A274为茶碱和本底,即溶剂、血清的吸光度,A298为本底的吸光度),ΔA= A274-A298。;;2.氨茶碱经静脉进入血液,随血液循环进行组织分布,达到平衡后转入消除相。时量曲线呈二房室动力学模型。
3.房室模型是抽象的数学模型,它的划分与解剖学部位或生理学功能无关。药物转运速率相同或相近的部位可划分为同一房室。房室模型可以分为一室模型、二室模型、多室模型。大多数药物在体内的转运和分布符合二室模型。即药物静脉注射入血后,首先快速进入血流量大的组织,如心、肝、肾、肺、脑等,然后缓慢地向血流量小的组织,如脂肪组织、静止的肌肉组织等转移。;【器材与药品】
754型紫外分光光度计,液体涡旋混和器,数学坐标纸、半对数坐标纸各一张。氨茶碱标准液,0.1mol/L HCl,0.1mol/L NaOH,异丙醇:氯仿抽提液(5:95)。
【实验动物】
家兔;【实验步骤】
1.取体重2.5-3kg健康家兔1只,一耳缘静脉注射氨茶碱15mg/kg,另一耳用锐利刀片切割取血。分别在给氨茶碱后5、10、20、30、60、120、180、300、420min取血。
2.分离血清,各管均取血清0.5ml于15ml试管中,加0.1mol/L盐酸0.2ml、抽提液5ml,振摇混合,2500r/min离心10min。;3.吸取下层氯仿液4ml置另一试管中,加入0.1mol/L NaOH溶液4ml,振摇混匀,2500r/min离心10min。
4.吸取上层碱液,以0.1mol/L NaOH溶液作参比,测定其在λ274和λ298处的吸收度(A274和A298),计算△A。
5. 制作茶碱标准曲线:取5支试管,依次加入茶碱标准液20、40、60、80、100μl,各加入0.1mol/L NaOH溶液4ml,终浓度依次为0.5、1.0、1.5、2.0、2.5μg/ml,测定各管的A274和A298,计算△A。以茶碱浓度为横坐标,△A为纵坐标描点绘图,用Excel软件求直线回归方程,即为茶碱标准曲线的直线方程(图示)。;① 将茶碱浓度和吸光度的数据录入Excel的工作表中。;;;;;;6. 将测得血清样品的△A代入标??曲线的方程,求得相应的C,C×10即为茶碱的血药浓度。以时间为横坐标,浓度对数为纵坐标,用CAPP软件描点做图,判断氨茶碱在体内代谢的房室模型。;① 将取血时间和茶碱血药浓度输入CAPP软件。;② 添加消除相的数据点,点击“更新曲线”。;③ 添加分布相的数据点,点击“更新曲线”。;;【注意事项】
1.紫外分光光度计使用前需预热30min并激发氢灯。
2.振摇混匀药液时防止溅出并准确加样。
3.样品离心前需配平。
4.测量时若更换波长,必须重新调节0和100%。
【讨 论】
1.氨茶碱的时量曲线呈几房室模型?为什么?
2.为何要测两个波长下茶碱的吸光度并取其差值?
3.试述药动学参数V1、Vd、t1/2α、t1/2β、K10、K12、K21、Cl、AUC的含义。;9、春去春又回,新桃换旧符。在那桃花盛开的地方,在这醉人芬芳的季节,愿你生活像春天一样阳光,心情像桃花一样美丽,日子像桃子一样甜蜜。7月-217月-21Thursday, July 15, 2021
10、人的志向通常和他们的能力成正比例。22:11:4322:11:4322:117/15/2021 10:11:43 PM
11、夫学须志也,才须学也,非学无以广才,非志无以成学。7月-2122:11:4322:11Jul-2115-Jul-21
12、越是无能的人,越喜欢挑剔别人的错儿。22:11:4322:11:4322:11Thursday, July 15, 2021
13、志不立,天下无可成之事。7月-217月-2122:11:4322:11:43July 15, 2021
14、Thank you very much for taking me with you on that splendid outing to London. It was the first time that I had seen the Tower or any of the other famous sights. If Id gone alone, I couldnt have seen nearly as much, because I wouldnt have known my way a
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