天然产物分离技术.pptxVIP

天然产物分离技术;前 言;;;;平面层析; PTLC（Preparative TLC） 制备量 g 级 1 吸附剂（adsorbents） 材料：Silica gel 尺寸：20*20 20*40 厚度：0.5-2 mm 2 样品带 手工 自动点样器; 样品带宽的解决方法 a 用极性流动相展开约2cm，使带变窄 b 用带浓缩带的板子 3 流动相选择 三角性法则 4 样品的收集洗脱 显色：定位 转移 洗脱; 5 PTLC制备样品时引入的杂质 粘合剂 杂质 指示剂 Other (分解物) (Al2O3 作吸附剂) 难点 解决办法：Sephedex LH-20 ; 6 技术发展 a HPTLC b 巨形板TLC 不锈钢板 (60*60) 厚度 5mm 上样量 ＞10g c 带浓缩带TLC d 展开方式 多次展开（同方向） 双向展开 e 移植TLC ;;;;;;柱 层 析Column Chromatogrphy;;;; 2 聚酰胺粉的制备 国产（15~30目） 层析用（80~100目） 粗粉蒸馏水浸泡过夜，磨细，混悬液直接使用 抽滤后，60~80度烘干2~3小时备用 3 操作 a 装柱 细粉水浸泡装柱，自然沉降 b 上样 20~30%水溶液上样 40-60 : 1 c 洗脱 水 含水醇 95%醇 3% NaOH 5% NaOH 4 再生 5% NaOH ;三、分配性柱层析 1 原理 利用混合物在两相互不混溶中分配系数不同，而达 到分离的一种柱层析方法。分配系数差异愈大，分 离效果愈好。 2 支持剂 硅胶、硅藻土、纤维粉 3 溶剂系统的选择 PC层析选择 4 操作 a 装柱 b 上样 c 洗脱 ;四、凝胶柱层析（Sephadex LH-20） 1 葡聚糖凝胶简介 由葡聚糖凝胶Sephadex G-25交联亲脂性羟丙基而制备，是同时具备吸附层析、分配色谱和分子筛功能的独特层析介质，溶剂系统没有限制，包括水相缓冲液、丙酮、乙酸乙脂、氯仿、二氯甲烷、四氢???喃、甲苯和各种混合溶剂，大量文献证明它非常适合于天然产物纯化，特别是中草药有效成分如甙类、生物碱、黄酮、蒽醌、内酯、帖类、甾类、多酚的分离。德国科学家Hans Henke著有Sephadex LH-20凝胶色谱分离专著，详尽叙述了Sephadex LH-20在植物化学研究中的应用。 ; 2 原理 分子筛：分子的大小和形状 吸附层析：被分离化合物与凝胶间的氢键 分配层析：被分离化合物在流动相（溶剂）和固定 相（凝胶）之间的分配 3 操作 a 装柱 洗脱剂溶胀后悬浮液搅拌装柱 b 上样 c 洗脱 水溶性好 水或电解质溶液 水溶性差 醇水或丙酮水 极性较小