《生物化学》第一章.pptxVIP

第一章 核酸; 掌握 核酸的元素组成、基本结构单位。 掌握 DNA的分子结构。 掌握 医学mRNA和rRNA的分子结构； 熟悉 tRNA的二、三级结构。 掌握核酸的理化性质；熟悉核酸分子杂交的原理。 ;;一、核酸的元素组成;;1．碱基;DNA分子 主要包含 A、G、C、T 四种碱基。 RNA分子 主要包含 A、G、C、U 四种碱基。 核酸分子中还有一些含量稀少的碱基，通常称为稀有碱基，主要存在于RNA中。;2．戊糖;β-D-核糖和β-D-2-脱氧核糖的差别仅在于分子结构中C-2′原子所连接的基团不同，β-D-核糖C-2′原子连接的基团是“OH”，β-D-2-脱氧核糖C-2′原子连接的基团是“H”。;3．磷酸; 核苷酸是由 核苷 或 脱氧核苷 与 磷酸 脱水缩合而成的，其中的核苷则是由戊糖与含氮碱基通过脱水缩合形成的。;;;一、DNA的一级结构;; DNA的二级结构分为两大类： 一类是右手双螺旋，如A-DNA、B-DNA、C-DNA和D-DNA等； 另一类是左手双螺旋，如Z-DNA。沃森和克里克发现的双螺旋是B型水结合DNA，在细胞中最为常见。;双螺旋结构的要点;DNA双螺旋结构的横向稳定性靠氢键维系，A与T间形成两个氢键，C与G间形成三个氢键。 DNA双螺旋结构的纵向稳定性靠碱基平面间的疏水性碱基堆积力维系。;大、小沟在DNA与蛋白质相互作用中起到了关键的作用，如引发甲基化作用、结合转录因子等。;三、DNA双螺旋结构与DNA复制;三、DNA的三级结构;电镜下环状DNA的环状结构和超螺旋结构;核小体是染色质的基本组成单位，由DNA和组蛋白以致密的结构组成，是DNA三级结构的另外一种形式。;;一、mRNA的结构; 原核生物mRNA的二级结构;;二、tRNA的结构; 1974年，科学家通过X射线晶体衍射法发现tRNA的三级结构为倒L形。 tRNA的三级结构是在三叶草结构的基础上折叠而成的，“CCA-OH”结构和反密码子处于倒L的两端，DHU环和T ψ C环形成了倒L的角，如右图所示。;三、rRNA的结构;rRNA是单链RNA，核苷酸序列中G-C碱基对与A-U碱基对的总量不等。单股rRNA链可自行折叠，形成螺旋区和环区，即二级结构。 所有来源rRNA均能形成4个结构域（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ），每个结构域均含许多茎（螺旋段）和环，它们通过无距离碱基对的相互反应彼此靠近，形成空间结构。;;一、核酸的理化性质;一、核酸的理化性质;对待测样品是否纯品可用紫外分光光度计读出260 nm与280 nm的OD值，因为蛋白质的最大吸收在280 nm处，因此从A260/A280的比值即可判断样品的纯度。 纯DNA的A260/A280应为，纯RNA应为。样品中如含有杂蛋白及苯酚，A260/A280比值即明显降低。;一、核酸的理化性质;增色效应;一、核酸的理化性质;二、核酸的应用——分子杂交;二、核酸的应用——分子杂交;