实验四经口急性毒性改进寇氏法测ld50余君.pptxVIP

经口急性毒性试验;急性毒性试验; 一 、实验目的;概念复习;LD50：半数致死剂量 指引起一组受试实验动物半数死亡的剂量。常用以表示急性毒性的大小。 其值越小，表示外源化学物的毒性越强；反之，毒性越低。 LD50是经过统计学计算得到的毒性参数，是一个统计量，受实验动物个体易感性差异的影响较小，因此是最重要的急性毒性参数。 ;LD50的意义：;LD50的计算方法;二 、实验原理;二 、实验原理;三、材料和试剂;四、操作步骤;; 剂量设计;1、剂量设置：雌雄，等比数级，灌胃容量：0.1ml/10g 雌LD100=240mg/kg，LD0=90mg/kg，k=1.28 雄LD100=250mg/kg，LD0=100mg/kg，k=1.26 ㈠雌性5个剂量组 各组浓度 ㈡雄性5个剂量组 各组浓度 240mg/Kg 24mg/ml 250mg/kg 25mg/ml 187.5mg/Kg 18.8mg/ml 198.4mg/kg 19.8mg/ml 146.5mg/Kg 14.7mg/ml 157.4mg/kg 15.7mg/ml 114.4mg/Kg 11.4mg/ml 125.0mg/kg 12.55mg/ml 90mg/Kg 9mg/ml 100mg/kg 10mg/ml 各组浓度＝各组剂量/ 灌胃容量 例:雌性最高剂量组浓度＝最高剂量/ 灌胃容量 ＝240mg/kg/0.1ml/10g＝24mg/ml;2、每组实际需要量V＝最终体积＋损耗量 ＝动物数×平均体重×灌胃容量＋损耗量 ＝10×25g×0.1ml/10g+2.5ml ＝5ml 3、 雌性最高剂量组溶液(即母液)： 雄性最高剂量组溶液（母液）： 24mg/ml配置22.9ml 25mg/ml配制24.2ml 雌A＝V * K / (K-1) 雄A= V * K / (K-1) ＝5*1.28/ ( 1.28－1) =5*1.26/(1.26-1) ＝22.9ml =24.2ml 4、下一组溶液的配置： 等比稀释法 A*（1/K） 雌性=A×（1/k）=22.9 ×(1/1.28)=17.9ml 雄性=A×（1/k）=24.2 ×(1/1.26)=19.2ml 从最高剂量组溶液A ml中取出5ml,作为高剂量组。剩余(A-5)ml,加油5ml，混匀后，再从中取出5ml作为下一个剂量组，依次类推，完成时，最低剂量组体积为A，其余各组体积均为5ml.;经口染毒;灌胃方法:; 中毒体征和动物死亡情况观察 1、中毒过程???潜伏期、中毒期、恢复期或死亡时间（只需记录中毒出现的时间＆死亡时间）。 2、中毒症状：参照《毒理学基础》，表6-1。 3、死亡的判断：呼吸、心跳停止，瞳孔扩散。 4、尸体的解剖：目的判断发生毒作用的靶器官，排除动物的 意外死亡。 ;;; ★急性毒性实验原始记录（14天） 受试物名称：敌敌畏 受试物性状：乳油状 受试物来源：毒理实验室 动物种属品系：小鼠，昆明种 动物来源：-----学院实验动物中心 染毒途径：经口灌胃 室温： 日期：;★ LD50的计算; 结果的计算与分析 计算公式：m=lgLD50＝Xk－i（∑p－0.5） Sm= 式中 Xk： 最大剂