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结核分枝杆菌(TB)分子生物学检测;结核分枝杆菌 ;精品资料;
你怎么称呼老师?
如果老师最后没有总结一节课的重点的难点,你是否会认为老师的教学方法需要改进?
你所经历的课堂,是讲座式还是讨论式?
教师的教鞭
“不怕太阳晒,也不怕那风雨狂,只怕先生骂我笨,没有学问无颜见爹娘 ……”
“太阳当空照,花儿对我笑,小鸟说早早早……”;TB形态;全球感染情况;实验诊断检测方法;常规检测方法;分子生物学检测(PCR)方法; 回顾RNA与DNA;RNA Vs DNA;结核菌快速测定;方法; 不同方法结核菌检测报告时间;HPA-MTD方法检测TB;优势(一)靶分子选取;优势(二)敏 感 度;样 本 前 处 理;杂 交;选 择;ATA TRAINING / TP / Nov 97;MTD结核分枝杆菌的直接检测意义;Gen-Probe结核分枝杆菌检测分析仪特点; GenoType? MTBDRplus 结核菌药敏试验;采用线性探针技术(Line-Probe或称DNA-Strip)检测结核分枝杆菌复合群利福平(rpoB)和异烟肼(katG和inhA)等结核治疗药物的耐药基因来判断TB体内耐药性; 异烟肼:katG和inhA基因
katG基因:编码触酶-过氧化物酶
40-100%异烟肼耐药是由该基因突变引起且为高水平耐药
inhA基因:编码NADH烯酰基ACP还原酶
25%异烟肼耐药是由该基因突变引起且为低水平耐药;分枝杆菌复合群中的耐药基因;DNA提取
PCR扩增
探针杂交
结果判断;DNA提取;PCR扩增;采用反向杂交方法
PCR扩增产物→变性(DNA成单链)→与探针杂交→洗涤→显色→判断结果; 杂交试剂;TwinCubator?
(可做12个条);GT-Blot? 20;GT-Blot? 48;
野生型:有杂交带显色为“+”,表示未发生突变
耐药突变位点:有杂交带显色为“+”,表示发生突变;敏感:所有野生型探针“+”和所有耐药位点探针“—”
耐药:对应药物有1条野生型探针“—”或有1条耐药位点“+”;结果解释;MTD试验与其它试验方法性能比较;MTD试验与其它试验方法性能比较;WHO、盖茨基金会推荐使用的快速线性探针技术,可以在6小时内给出药敏鉴定结果;
可以做一线结核药物(异烟肼 利福平)、二线结核药物的耐药检测(乙胺丁醇、氟喹诺酮类药物、可注射结核药物);
标本是涂片阳???的痰标本,或者是培养物;
技术步骤简单:核酸提取、PCR扩增、核酸杂交仪检测;
核酸杂交仪有三款可选择:手工型(12个样本)、GTBlot 20(20个样本)和GTBlot 48 (48个样本);
每个试剂条上自带质控:CC杂交质控、AC扩增质控、TUB结核分枝杆菌质控,确保整个实验流程的可信度;;GenprobeHain产品市场段;结核分子诊断技术VIP 用户;引进理由;政府的管理决心
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