血液rna提取方法.docxVIP

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  • 2021-08-03 发布于广东
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公司标准化编码 [QQX96QT-XQQB89Q8-NQQJ6Q8-MQM9N] 公司标准化编码 [QQX96QT-XQQB89Q8-NQQJ6Q8-MQM9N] 血液RNA提取方法 血液RNA提取方法 取新鲜的血液(紫管),加入3倍体积红细胞裂解液,混匀后室温放置10分钟,10,000 rpm离心1分钟。 彻底吸弃上清,收集白细胞沉淀。 每100-200μl血液收集的白细胞沉淀加入1ml TRIzol。室温放置5min,使样品充分裂解。 4℃ 12,000 rpm 离心10分钟,取上清()。 每1ml TRIzol加入200μl氯仿,剧烈振荡混匀后室温放置3-5 min,自然分相。 4℃ 12,000rpm离心10-15min。样品会分成三层:黄色的有机相,中间层和无色的水相,RNA主要在水相中,把水相转移到新管中(小心吸取水相) 在上清中加入等体积冰冷的异丙醇(),室温放置10-20min。 4℃ 12,000 rpm离心10min,弃上清,RNA沉淀于管底。 RNA沉淀中加入1ml 75%乙醇(用RNase-free水配制,),温和振荡离心管,悬浮沉淀。 4℃ 5,000-8,000 rpm离心1-2min,弃上清。 室温放置1-2分钟晾

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