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感受态细胞的制备：
以1:100的比例吸取过夜菌液（250ul）加入25ml LB液体培养基中，37℃，200r/min振荡培养2-3h至OD600达到0.5左右（OD600范围0.4-0.6）。
将25ml菌液移至预冷的50ml聚丙烯离心管中，在冰上放置30min，使培养物冷却到0℃。
于4℃，以4000rpm离心10min，回收细胞。
倒出培养液，将管倒置1min（于滤纸/吸水纸上），使最后残留的痕量培养液流尽。
每50ml菌液用10ml预冷的0.1mol/L的CaCl2，重悬每份沉淀，放置于冰浴上30min。
于4℃，以4000rpm 离心10min，回收
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