扬州大学基因工程期末试题复习要点整理.pdf

基因工程期末试题 复习要点整理 基因工程是 70 年代出现的一门科学，是生物学最具生命力和最引人注目的前沿 科学之一，是现代生物技术的代表，是生命科学类专业中的一门重要的专业课。 本课程主要介绍基因工程概述、 重组 DNA基本技术及原理、 基因克隆、 基因的分 离及鉴定、基因工程的表达系统、基因工程的应用等。通过本课程的学习，使学 生掌握基因工程技术的基本原理和了解该技术在动物、 植物和微生物等方面的应 用，为今后从事生物学教学、 生物技术研究和产品开发， 或进一步的研究生学习 科研打下坚实的理论及专业基础。 扬州大学试题纸 一、名词解释：共 10 题，每题 2 分，共 20 分。 1. 基因 : 是 DNA分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列，是遗传物质的最 小功能单位。 2. 定位克隆 : 获取基因在染色体上的位置信息，然后采用各种方法对该基因进 行定位和克隆 3. 融合基因 : 是指应用 DNA体外重组技术构建的一类具有来自两个或两个以上 的不同基因核苷酸序列的新型基因。 4. 转化子 : 导入外源 DNA后获得了新遗传标志的细菌细胞或其他受体细胞，又 称重组体。 5. 人工接头：是人工合成的具有一个或数个特定限制性内切酶识别和切割序列 的双股平端 DNA短序列。 6. RT-PCR: 是指以 mRNA在反转录酶作用下合成 cDNA第一链为模板进行的 PCR。 7. ORF : 起始于 AUG、止于 UAA、UGA、UAG的连续的密码子区域，是潜在的编 码区。 8. MCS: 指载体上人工合成的含有紧密排列的多种限制核酸内切酶的酶切位点 的 DNA片段。 9. gene targeting : 基因工程中利用活细胞染色体 DNA可与外源 DNA的同源性 DNA序列发生重组的性质，来进行定点修饰改造染色体上某一目的基因的技术 10. 5 ’RACE:是一种通过 PCR进行 cDNA末端快速克隆的技术，是以 mRNA为模 板反转录成 cDNA第一链后用 PCR技术扩增出某个特异位点到 5’端之间未知序 列的方法。 四、简答题：共 4 题，共 20 分。 1．简述获得目的基因常用的几种方法。（ 5 分） 答： （1）直接从染色体 DNA中分离：（ 1 分） 仅适用于原核生物、叶绿体和线粒体基因的分离，较少采用。 （2）人工合成：（ 1 分） 根据已知多肽链的氨基酸顺序， 利用遗传密码表推定其核苷酸顺序再进行人工合 成。适应于编码小分子多肽的基因。 （3）从 mRNA合成 cDNA：（1 分） 采用一定的方法钓取特定基因的 mRNA，再通过逆转录酶催化合成其互补 DNA （cDNA），除去 RNA链后，再用 DNA聚合酶合成其互补 DNA链，从而得到双链 DNA。这一方法通常可得到可表达的完整基因。 （4）利用 PCR合成：（ 1 分） 如已知目的基因两端的序列，则可采用聚合酶链反应 (polymerase chain reaction,PCR) 技术，在体外合成目的基因。 （5）从基因文库中筛选：（ 1 分） 首先建立基因组或 cDNA文库，利用探针从文库中筛选目的克隆。 2. 分子克隆载体应具备哪些特点？（ 4 分） 答： (1) 在宿主细胞内必须能够自主复制（ 1 分） (2) 必须具备合适的酶切位点， 供外源 DNA片段插入， 同时不影响其复制 （1 分） (3) 有一定的选择标记，用于筛选（ 1 分） (4) 具有较高的拷贝数，便于载体的制备（