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- 2021-08-03 发布于河北
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三、转基因的检测;(一)遗传标记法
在表达载体中安装选择性基因
如对某种抗生素的抗性基因,对某种除草剂的抗性基因等
在表达载体中安装报告基因
转化处理过的受体在相同条件下都能生长,但转化体具有非转化体所不具有的某种特殊表现(称为显性的报告基因),或者转化体不具有非转化体的表现(称为隐性的报告基因)。;1. 利用选择性基因;2.利用报告基因
gus基因、萤火虫荧光素酶基因等,应用较为广泛的是gus基因,即β-葡糖苷酸酶基因。gus基因来自细菌,所编码的β-葡糖苷酸酶,与5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D葡糖苷酸酯(简称为X-Gluc)的底物发生作用时,能产生蓝色沉淀反应。既可用分光光度计测定,又可直接观察到植物组织由沉淀形成的蓝色斑点;GFP(Green Fluorescence Protein);(二)分子生物学方法检测;1、 DNA水平;;;gDNA提取方法;(1)DNA extraction buffer :
final concentration
0.35M sorbitol 63.75g sorbitol(S29) 山梨醇
0.1M Tris 200ml of 1M Tris, pH7.5
5mM EDTA-Na2
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