利用模式动物研究遗传性出生缺陷的发生机理..pdfVIP

项目名称： 利用模式动物研究遗传性出生缺陷的发 生机理 首席科学家： 孟安明 清华大学 起止年限： 2005.12 至 2010.11 依托部门： 教育部 科研中国 [www.SciE] 收集于网络，仅供参考 一、研究内容 1. 大规模诱变产生神经系统和心脏发育突变体并定位突变基因 果蝇、斑马鱼和小鼠都适于进行大规模诱变研究， 我们将通过 ENU 诱变技术、 P-转座子插入诱变技术、 反转录病毒插入诱变技术创造大量的神经系统和心脏发 育突变体， 建立起我国自己的出生缺陷模式动物资源库。 我们将用果蝇筛选心脏 发育缺陷和神经病变的突变体， 用斑马鱼筛选头部和心脏发育缺陷的突变体， 用 小鼠筛选神经系统缺陷的突变体。对这些突变体的表型（包括伴生性其它缺陷） 进行详细的分析，并从突变体中克隆突变基因。 2. 研究神经系统和心脏发育的基因调控网络 利用获得的突变体 ,检测相关已知基因的表达谱是否发生改变；利用差减杂 交、 mRNA 差异显示、 DNA 芯片、质谱分析等技术发现在突变体胚胎和正常胚 胎中差异表达的新基因； 利用酵母双杂交、 亲和层析等技术寻找与突变基因编码 产物互作的新因子； 通过报告基因系统、 转基因等途径研究相关基因之间的上下 游关系和调控机理。 通过这些研究将不断地发现与神经系统和心脏发育相关的新 基因、甚至新的信号通路，并不断充实这些信号通路和基因所涉及的调控网络。 3. 对在早期神经系统和心脏中表达但功能未知基因的功能研究 选择一些在早期神经系统和心脏中表达、可能与 、Wnt 和 Fgf 信号通 路相关、而在相关组织器官发育中的功能不明确的基因， 利用动物基因敲除技术、 靶基因选择诱变技术和转基因技术等研究它们的生物学功能； 本项目筛选出的新 基因 （包括人和动物的）也将用这些方法进行研究。 这类反向遗传研究不仅可以 阐明基因的功能， 从分子水平上更深入地了解神经系统和心脏发育的机理， 也将 科研中国 [www.SciE] 收集于网络，仅供参考 产生许多人类神经系统出生缺陷和先天性心脏病的动物模型。 4. 分析我国神经系统缺陷和先天性心脏病新生儿的致病机理 收集神经系统缺陷和先天性心脏病新生儿家系样本； 选择可引起模式生物神 经系统或心脏发育缺陷的基因， 通过基因信息学方法查寻人类同源基因， 用这些 基因作为候选基因， 利用关联分析和连锁分析等手段定位相应出生缺陷儿的致病 基因。利用差减杂交和 DNA 芯片等技术，比较正常流产胎儿和死亡畸形胎儿基 因表达差异， 寻找出在相关组织中特异表达的一些功能未知基因， 再在动物上通 过突变和转基因等研究它们的功能。 二、预期目标 总体目标： 出生缺陷是影响我国人口素质的一个重要因素， 并造成严重的社会和经济负 担。本项目将充分综合利用小鼠、斑马鱼、果蝇的取材及遗传操作性的优势，以 在我国高发的神经系统缺陷和先天性心脏病为主攻方向， 一方面高通量筛选建立 出生缺陷的动物模型， 发现在神经管形成和分化及心脏发育中起重要作用的新的 信号通路和新的基因， 深入了解它们发挥其功能的分子机制和调控网络， 推动我