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农学生物化学转录会计学RNADNA 转录 (transcription) 生物体以DNA为模板合成RNA的过程 。DNA的遗传信息传递给RNA的过程。 转录牛牛文库文档分享复制和转录的共同点:DNA 模板依赖DNA的聚合酶碱基配对规律生成磷酸二酯键链延长方向5→3牛牛文库文档分享复制和转录的区别 牛牛文库文档分享第一节模板和酶Templates and Enzymes牛牛文库文档分享一、转录模板结构基因 (structural gene) ： 能作为转录模板的DNA区段。编码链5′···GCAGTACATGTC ···3′3′··· c g t g a t g t a c a g ···5′模板链转录mRNA5′···GCAGUACAUGUC ···3′翻译N······Ala · Val · His · Val ······C蛋白质牛牛文库文档分享模板链(template strand)有意义链或Watson链 DNA双链中，能按碱基配对规律指引转录，生成RNA的一股单链。编码链(coding strand)反义链或Crick链 DNA双链中碱基序列与RNA一致的一股链。反义核酸：以编码链为模板合成的核酸，称为反义核酸（反义RNA、反义DNA）。 序列与模板链一致，能抑制mRNA表达。牛牛文库文档分享转录方向转录方向不对称转录 (asymmetric transcription)在DNA分子双链上某一区段，一股链用作模板指引转录，另一股链不转录 。模板链并非永远在同一条单链上。结构基因3?5?5?3?编码链模板链模板链编码链牛牛文库文档分享二、RNA聚合酶定义：以DNA为模板，催化三磷酸核苷 （NTP）聚合形成RNA的酶。作用特点：DNA为模板不需引物，两游离NTP或一游离NTP与RNA链聚合.3-OH与5-P聚合形成磷酸二酯键。方向：5→3。牛牛文库文档分享（一）原核生物的RNA聚合酶牛牛文库文档分享???????????核心酶 (core enzyme)全酶 (holoenzyme)核心酶: 转录延长;全酶：转录起始。σ70是辨认典型转录起始点的蛋白质。σ32是辨认热休克蛋白(Hsp)转录起始点的蛋白质。牛牛文库文档分享 RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合 牛牛文库文档分享（二）真核生物的RNA聚合酶 45S-rRNA，5S-rRNA： 核糖体RNA成分。 hnRNA： mRNA的前体。 snRNA： 参与mRNA剪切。 牛牛文库文档分享RNA聚合酶结构特点：两个大亚基：分子量100 KDa，催化亚基， 与原核β，β亚基有同源性。50 kDa亚基：分子量 50 kDa， 与原核α亚基相似。 小亚基：10，7，11个。羧基末端结构域(CTD)： (YSPTSPS)n：Y：Tyr；S：Ser；P：Pro；T：ThrRNA-polⅡ大亚基C末端磷酸化，使转录进入链的延长阶段。牛牛文库文档分享调控序列结构基因5?3?3?5?RNA-pol三、模板与酶的辨认、结合操纵子(operon):原核生物的一个转录单位，包括若干个结构基因及其上游(upstream)的调控序列。 启动子(promoter): RNA聚合酶结合模板DNA的部位。牛牛文库文档分享RNA聚合酶保护法牛牛文库文档分享目 录RNA聚合酶保护区结构基因3?5?5 ?3 ?3 ?5 ?3?5?-50-40-30-20-10110开始转录-10 区-35 区T T G A C AA A C T G TT A T A A T Pu A T A T T A PyRNA-pol辨认位点(recognition site) (Pribnow box)原核生物启动子保守序列牛牛文库文档分享牛牛文库文档分享 原核生物启动子结构特点： 一致性序列(concensus保守序列)： 碱基序列相对稳定，不易发生突变。TTGACA：-35区，RNA聚合酶的辨认位点，σ亚基结合位点。TATAAT：-10区，Pribrow盒，RNA聚合酶的稳定结合位点。β亚基的结合位点。牛牛文库文档分享顺式作用元件转录起始 增强子 TATA盒 CAAT盒 GC盒 结构基因-GCGC---CAAT---TATA真核生物启动子保守序列牛牛文库文档分享 第二节 转录过程The Process of Transcription牛牛文库文档分享一、原核生物的转录过程牛牛文库文档分享（一）转录起始转录起始需解决两个问题：RNA聚合酶必须准确地结合在转录模板的起始区域。DNA双链解开，使其中的一条链作为转录的模板。牛牛文库文档分享转录起始过程： 辨认起始位点： ?亚基辨认启动子的-35区，RNA聚合酶全酶 (?2????)与模板疏松结合。 酶滑行到-10区，通过??亚基与模板牢固结合。 2. DNA双链解开: R