原发性肝癌组织双向电泳技术优化(临床医学论文).docVIP

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原发性肝癌组织双向电泳技术优化(临床医学论文) 文档信息 主题: 关于“医学心理学”中“肿瘤学”的参考范文。 属性: F-00BNE6,doc格式,正文7387字。质优实惠,欢迎下载! 适用: 作为医学论文、临床医学写作的参考文献,解决如何写好实用应用文、正确编写文案格式、内容摘取等相关工作。 作者: 邱芳华 聂静 沈顺利 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 搞要 1 关键字:原发性肝癌; 蛋白质组学; 双向电泳 2 1 材料与方法 3 第二向 SDS 电泳 5 2 结 果 5 3 讨 论 6 【参考文献】 9 论文原创声明(模板) 11 论文致谢(模板) 12 正文 原发性肝癌组织双向电泳技术优化(临床医学论文) 搞要 摘要:目的优化双向凝胶电泳的实验步骤,总结出一套适用于原发性肝癌组织的双向凝胶电泳技术。方法对双向电泳实验中的关键环节:样本处理、上样方法、聚焦条件等进行研究与优化,考马斯亮蓝染色后进行凝胶图像比较。结果采用7mmol/L尿素、2mol/L硫脲、40g/LCHAPS、100mmol/LDTT、5g/L(pH3-10)IPGbuffer,1mmol/LPMSF作为裂解液,丙酮沉淀蛋白,主动水化上样法,聚焦电压达到140kV可以得到分辨率高、重复性好的结果。结论上述改良提高了2-D图谱中蛋白位点的分辨率和重复性,为原发性肝癌组织的蛋白质组学研究奠定了基础。教师论文发表 关键字:原发性肝癌; 蛋白质组学; 双向电泳 Abstract: 【Objective】 To establish a set of two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis (2-DE) techniques for proteomic research of hepatocellular carcinoma (HCC) tissues. 【Methods】 Different methods or condition for key procedures of 2-DE were adjusted and optimized, including sample preparation, sample loading methods, iso-electronic focusing (IEF), comparing with the gel after Commassie blue staining. 【Results】 High-resolution results with repetitiveness could be obtained according to the condition: 7 mmol/L urea, 2 mmol/L thisurea, 4%CHAPS, 100 mmol/L DTT, % (pH 3-10) IPG buffer, 1 mmol/L PMSF as lysis buffer, actone precipitate protein, initiative rehydration method and IEF to 140 kV. 【Conclusion】 The optimized method provided 2-D results with high resolution and repetitiveness, which pave the way for the proteomic research for HCC tissues.教师论文发表 原发性肝癌(以下简称肝癌)是我国最常见的恶性肿瘤之一,死亡率在我国恶性肿瘤中位居第二[1]。蛋白质组学是研究肿瘤发生机制[2],寻找肿瘤标志物的重要工具,对于肝癌发生机制和治疗作用靶点的研究具有重要意义[3]。我国早在2003年就启动了人类肝脏蛋白质组计划(HUPO),并取得了一定的研究成果。但关于肝癌组织双向电泳的技术却少完整系统的报道,为了建立高分辨率可重复的肝癌组织双向凝胶电泳技术,我们对人肝癌组织的双向电泳技术中的关键环节进行了研究对比,优选出一套适合肝癌组织的双向凝胶电泳方法,供从事肝脏蛋白质组学双向电泳的技术人员参考。教师论文发表 1 材料与方法 材 料 标本采集 原发性肝癌组织来自我院肝癌切除术患者。组织离体后立即以预冷PBS冲洗,在冰上分装置入冻存管,液氮中速冻,后转入-80 ℃冰箱中保存备用。所有病例均经术后病理证实为原发性肝细胞癌。教师论文发表 试 剂 丙烯酰胺、甲叉双丙稀酰胺、过硫酸胺、四甲基乙二胺(TEMED)、三羟甲基氨基甲烷 (Tris)、尿素、十二烷基硫酸钠(SDS)

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