第二章基因工程工具酶(简化版).pptxVIP

第二章 基因工程的工具酶;一、限制性核酸内切酶的发现;核酸酶：水解断裂多核苷酸链的两个相邻核苷酸的3,5磷酸二酯键 核糖核酸酶（RNase）： 脱氧核糖核酸酶（DNase）： 核酸外切酶（exonuclease）： 核酸内切酶（endonuclease）：; 二、限制性核酸内切酶的分类;平末端 粘性末端 1单位酶活性(1unit 1U)：在最适反应条件下1小时完全切割1ugλDNA样品的酶量。 同序同裂酶(识别及酶切位点相同): 同序异裂酶(识别位点相同但酶切位点不同): 同尾酶(酶切位点不同但产生相同的粘性末端):;酶切位点的计算：;三、限制性核酸内切酶的命名;思考题： 流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae）d菌株有三种限制酶，分别怎么表示？;一、天然DNA的制备 ;2、天然DNA的提取 ;二、DNA的纯化 ;三、 DNA的浓缩 ;四、限制性核酸内切酶反应;2、单酶切法; 3、双酶切法 ;4、部分酶切;5、DNA分子的限制性图谱;五 、影响核酸内切限制酶活性的因素;第三节 DNA聚合酶 ;一、DNA聚合酶概述 DNA聚合酶（polymerase）： 以DNA或RNA为模板催化合成互补新链的酶。大多需要一个引物来起始互补新链的合成。 ;;（1）以DNA聚合酶I为代表的“合成型”（