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呋塞米对大鼠利尿作用
目: 利尿药是一个直接作用于肾脏, 增加电解质和水排出从而使尿量增加药。其中呋塞米是这种药代表, 也是一个强效利尿药。在学习了利尿药利尿机制以后, 以本试验来验证性观察呋塞米对麻醉大鼠以及清醒大鼠利尿作用, 从而加深对利尿药及其机制了解, 并掌握麻醉和清醒动物利尿方法。
原理: 呋塞米是一个高效利尿药, 其作用机制为: 与肾小管髓袢升支粗短上皮上Na+——K+——2Cl-同向转运体选择性结合, 从而抑制了其转运能力, 所以, Na和Cl在肾小管处重吸收就受到抑制, 所以尿浓缩功效受到影响, 从而排出大量几乎等渗尿液。
同时, 预先用1%NaCl对试验大鼠进行水负荷能够使试验现象愈加显著。对清醒大鼠利尿试验应采替换谢笼法。
一 呋塞米对麻醉小鼠利尿作用
1 材料与方法
1.1 试验动物: 雄性大鼠
1.2 试验药品: 乌拉坦麻醉药, 1%呋塞米, 生理盐水
1.3 试验器材: 手术剪, 止血钳, 眼科剪, 烧杯, 刻度试管, 导尿管, 丝线, 缝针, 试验台, 灌胃针。
2 试验方法:
取一只正常大白鼠, 称重, 然后用生理盐水根据20ml/kg百分比进行灌胃处理。
腹腔注射乌拉坦1.2g/kg进行麻醉。麻醉好后将大鼠固定在大白鼠台上, 取仰卧位, 然后从颈部作一纵切口, 分离出一侧颈外静脉, 并做好静脉插管。
做腹部切口, 暴露膀胱, 并以荷包蛋缝合方法对膀胱进行插管, 并排空膀胱。
于颈静脉插管处注射生理盐水1ml/kg, 并搜集20分钟尿液流出量作为正常值。
一样方法注射呋塞米1ml/kg, 并搜集20分钟尿液。比较尿量改变。
3 试验结果: 以下。
分别注射生理盐水和呋塞米20分钟搜集到尿量
组号
生理盐水
呋塞米
1
0.45
2.5
2
0
1
3
0
0.28
4
0
2.1
5
1
3
均数
0.29
1.776
标准差
0.442
1.114
p值
0.0151
4 结果分析:
从上表能够看出, 每组试验注射生理盐水后搜集尿量显著比注射呋塞米后小, 说明了呋塞米确有利尿作用。
每组所得试验结果偏差较大, 以致标准差很大。这与试验动物生理状态, 试验操作过程相关, 是因为个体原因造成。
能够看到, p<0.05, 这说明统计结果含有统计意义, 即呋塞米含有高效利尿作用。
5 注意事项
分离颈总静脉和插管时, 应尽可能小心, 不可大力撕扯, 因为经脉璧薄易被撕裂或者误伤。
膀胱插管不宜过深。在做腹部手术时应注意不可损伤输尿管。
全部插管内空气均应排洁净。
二 呋塞米对清醒大鼠利尿作用
1 材料与方法
1.1 试验动物: 大白鼠
1.2 试验药品: 1%呋塞米, 生理盐水。
1.3 试验器材: 称, 注射器, 灌胃针, 烧杯, 代谢笼。
2 试验方法:
每组取大鼠2只(大小尽可能相同), 称重, 并给大鼠灌胃, 灌胃比列为: 生理盐水30ml/kg。
将两只大鼠分开, 其中一只放入代谢笼内做对照组。另一只肌内注射呋塞米: 1ml/kg。放入另一代谢笼。
观察。没30分钟搜集尿液一次, 连续观察90分钟。
3 试验结果: 以下表。
组号
30min对照组
30min试验组
60min对照
60min试验组
1
0
6.4
0
9.8
2
0
4.9
0
7.3
3
2.5
7.5
3
11.4
4
0
3.2
2
4.8
均数
0.625
5.5
1.25
8.325
标准差
1.25
1.867
1.5
2.893
p值
0.005
0.005
4 结果讨论:
每组注射呋塞米大鼠尿量显著多于注射生理盐水大鼠, 说明呋塞米能使大鼠尿量增多, 即含有利尿效果。
由表可知, 30分钟和60分钟均可得p<0.01, 即所得结果含有高度统计学意义, 说明了呋塞米含有显著利尿作用。
各组试验数据差异与大鼠个体差异和操作人员操作以及试验时间等原因不一样相关, 不过不影试验整体结果。
5 注意事项:
在对对照大鼠处理时, 能够肌内注射生理盐水: 1ml/kg, 以确保两只老鼠所受刺激等原因影响一致。而且在试验过程中, 应尽可能确保两只老鼠所处环境相同, 避免影响试验结果。
三 总结
在试验过程中, 第二个试验比较简单, 都能很好得出结果, 只是对灌胃技术掌握不是很好, 缺乏练习, 造成灌胃困难。
第一个试验相对困难, 两处手术对大鼠造成了很大伤害, 在做插管时, 关键是对颈静脉插管不熟悉, 以及首次接触荷包缝合方法故使试验时间延长。
这两个试验一起做, 但没有证实呋塞米对清醒和麻醉大鼠利尿作用有什么不一样之处。能够另作研究。
固定大鼠时用力过大, 麻醉药品使用过多, 麻醉药浓度过高, 静脉推注呋塞米过快, 试验时间过长等原因均可造成试验大鼠死亡而使试验失败。为了确保试验成功,
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