重组DNA技术与基因工程讲义.pptxVIP

重组DNA技术与基因工程1 重组DNA技术与基因工程的基本概念重组DNA技术所需的基本条件2 重组DNA技术的操作过程3 目的基因的克隆与基因文库的构建4 外源基因在大肠杆菌中的表达5 外源基因在酵母中的表达6 6 外源基因在酵母中的表达A酵母作为表达外源基因受体的特征酵母的分类学特征 酵母（Yeast）是一群以芽殖或裂殖方式进行无性繁殖的单细胞真核生物，分属于子囊菌纲（子囊酵母）、担子菌纲（担子酵母）、半知菌类（半知酵母），共由56个属、500多个种组成。如果说大肠杆菌是外源基因最成熟的原核生物表达系统，则酵母菌是最成熟的真核生物表达系统。6 外源基因在酵母中的表达A酵母作为表达外源基因受体的特征酵母表达外源基因的优势全基因组测序，基因表达调控机理比较清楚，遗传操作简便具有原核细菌无法比拟的真核蛋白翻译后加工系统大规模发酵历史悠久、技术成熟、工艺简单、成本低廉能将外源基因表达产物分泌至培养基中不含有特异性的病毒、不产内毒素，美国FDA认定为安全的基因工程受体系统（Generally Recognized As Safe GRAS）酵母菌是最简单的真核模式生物6 外源基因在酵母中的表达B酵母的宿主系统广泛用于外源基因表达的酵母宿主提高重组蛋白表达产率的突变宿主抑制超糖基化作用的突变宿主减少泛素依赖型蛋白降解作用的突变宿主广泛用于外源基因表达的酵母宿主目前已广泛用于外源基因表达和研究