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1.抗虫棉的培育过程是什么?依据原理是?2.限制酶的作用特性是?黏性末端的读法?如何判断两个基因片段能否被连接?如何判断两个基因片段是否由同种酶切割得到?3.基因组文库和cDNA构建方法是?4.将目的基因导入动、植、微生物细胞常用的方法有哪些?目的基因的检测内容及方法有哪些?5.运载体必须具备的条件有哪些?6.基因工程的基本步骤有?获取目的基因的方法有哪三种?基因表达载体的组成是?该过程所需的酶有哪些?1.3 基因工程的应用§1.3基因工程的应用1、植物基因工程硕果累累2、动物基因工程前景广阔3、基因工程药物异军突起4、基因治疗曙光初照一.抗虫转基因植物优点 —避免化学杀虫剂的污染Bt毒蛋白基因Bt毒蛋白 水解成 有毒多肽蛋白酶抑制剂基因基因消化不良淀粉酶抑制剂基因植物凝集素基因不吸收抗虫害的玉米二.抗病转基因植物抗病毒 —病毒外壳蛋白基因 —病毒的复制酶基因基因抗真菌 —几丁质酶基因 —抗毒素合成基因基因抗细菌 —裂解肽基因 —溶菌酶基因抗烟草花叶病毒的转基因烟草转黄瓜抗青枯(细菌)病基因的马铃薯Bt毒蛋白 水解成 有毒多肽三.抗逆转基因植物抗旱、抗盐碱调节细胞渗透压的基因鱼的抗冻蛋白基因耐寒烟草,番茄基因抗除草剂大豆、玉米抗除草剂基因我国科学家在实验田观察转鱼抗冻蛋白基因的番茄转基因抗除草剂玉米四.利用转基因改良植物的品质问题大豆、玉米、大麦、小麦粮食①导入含必需AA多Pro的编码基因解决②改变AA合成过程中关键酶活性问题难保鲜果蔬解决控制番茄成熟的基因(延迟番茄成熟)富含胡萝卜素的“金大米”。 不会引起过敏的转基因大豆富含赖氨酸的转基因玉米四.利用转基因改良植物的品质观赏花卉问题颜色单调,变色困难解决花青素有关调节基因转基因龙胆花转基因蓝猪耳抗虫蛋白酶抑制剂基因抗逆性淀粉酶抑制剂基因植物凝集素基因抗病毒 —病毒外壳蛋白/复制酶基因植物基因工程抗病抗真菌 —几丁质酶/抗毒素合成基因基因抗逆问题大豆、玉米、大麦、小麦粮食①导入含必须AA多Pro的编码基因解决②改变AA合成过程中关键酶活性问题难保鲜改善品质果蔬解决控制番茄成熟的基因(延迟番茄成熟)问题颜色单调,变色困难观赏花卉解决花青素有关调节基因Bt毒蛋白基因一.用于提高动物生长速度生长速度生长激素解决方法导入生长激素基因绵羊:生长速度提高30%,体积增加50%成功案例鲤鱼:9个月后,体重增1.5kg二.用于改善畜产品的品质喝牛奶过敏、呕吐、腹泻问题乳糖不消化原因显微注射技术肠乳糖酶基因构建表达载体导入正常牛对策牛奶中乳糖含量减少,其他营养成分不受影响转基因牛三.用转基因动物生产药物乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷)设想:让牛奶中产出生长素、抗凝血蛋白、血清白蛋白、α-抗胰蛋白酶等乳腺生物反应器 产量高、质量好、成本低、易提取(把哺乳动物变成成“批量生产药物的工厂)药用蛋白基因乳腺蛋白基因启动子+对策(只在乳腺中且在泌乳期表达)构建基因表达载体显微注射技术受精卵导入______细胞送回母体发育成新个体新个体泌乳期乳汁中产药具特殊用途的猪和小鼠四.用转基因动物作器官移植的供体器官移植问题—1、供体器官少2、排斥反应强用猪的器官做供体抑制抗原决定基因表达1、抑制抗原决定基因 表达的调控因子2、去除抗原决定基因(受精卵)导入猪受精卵克隆技术培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪例2、英国科学家已经研究用动物的器官作为器官移植的器官来源,科学家发现猪的内脏器官与人的内脏器官大小、形态均差不多,他们从20世纪80年代就开始研究。研究的重点是改造猪细胞膜。(1)猪细胞膜的基本结构和人的细胞膜是相同的,但其上的 和人细胞膜有很多是不同的。(2)改造猪细胞膜主要是通过 技术进行,具体操作步骤:糖蛋白基因工程第一步,获得控制目的基因(人体细胞膜上蛋白质合成的基因),所用的方法有 。 第二步,将目的基因与 结合;第三步,将目的基因导入受体细胞,对猪来说,应导入其 细胞最有效。在这项技术中,必须使用的两种工具酶是 和 。从基因文库中获取、PCR法、人工合成法运载体受精卵DNA连接酶限制酶小结抗虫抗逆性提高生长速度抗病植物基因工程动物基因工程抗逆改善产品品质粮食生产药物改善品质果蔬作器官移植供体观赏花卉三、基因工程药物异军突起第一种基因工程药物 —重组人胰岛素提取部位 — 细胞、组织、血液等传统提取胰岛素、干扰素基因工程制药提取量 — 少缺点 —材料少、提取难、成本高构建提取部位 — “工程菌”(大肠杆菌、酵母菌)“工程菌”改进 —提取量 — 多优点 —高效、高质量、低成本菌优点: 繁殖快 单细胞 遗传物质少重组质粒基因工程药物异军突起转基因抗乙肝西红柿,虽然不能治愈乙肝,但一年只吃几个抗乙肝西红柿,就完全能代替注射乙肝疫苗。抗乙肝西红柿属于转基因食品,就是将乙肝疫苗植入西红柿内,经过多
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