分光光度计测定微量铁.docx

?可修 ?可修编? -可修编- -可修编- 分光光度计洲定敏量铁 -、目的 1、 学习如何选择吸陇光度分析的实验条件。 2、 掌樨用吸光光度法测定铁的原理及方法。 3、 掌报分光光度计的使用方法。 二原理 1、 光度法湯定的条件：分光光度法洲定物质含量时应注意的条 件主要是显色反应的条件和JU定吸光度的条件。显色反应的条件有显 色剂的用量，介质的酸度、显色时泪度、显色时间及干抗物质的消除 方法等；测量吸光度的条件包括人射光波长的选择、吸光度围和参比 溶液等。 2、 二氮杂菲-北铁络合物：朝二氮衆菲是湯定微量铁的一种较好 的试剤。在PH=2~9的条件下Fe岗子与邻二氮杂菲生成稳定的情 纟I包络合物,此络合物的lgK# =21.3,摩尔吸光系es10=1.1x104 在显色前，首先用盐酸里版花F歆岗子还原为Fe2,高子，其反 应式如下： 2Fe3*+2NH2OH - HCI—2 Fe2*+N2+2H2O+4H+2CI 刈定时，控制溶液酸傍在PH=5左右较为适宜。酸度过高，反应 避行较慢；酸度太0L II F玲离子水解，散响显色。 Bi。Cd2+, Hg2\ Ag+, Z矽等离子与显色剤生成沉淀，Ca2\ Cu2\ M?等崗子与显色剂形成有色络合物。Sllt^ji些崗子共存时，应注 意它们曲干抗作用。 三、试剂 10Mg/mL的铁标准浪；盐酸在腹固体攻10%洛液（因其不稳定, 需临时用时配）；0.1%邻二氮杂菲（新KM ） ; 1 mol/LNaAc溶浪。 四、 标准铁的有备 林取0.7022g碩稜亚挟彼|Fe（NH4）2（S04）2-6H20],置于境杯中,加 人6mol/L HCL 20ml和少量水，浴鮮后定容1项于70ml磷酸滔浪中, 滴加0.02mol/L的高钻酸押滔濾至出现微红色不变，用抑水定容至 WOOmlo此吧备溶浪1.00ml含0.100m。铁。 五、 指示刑的选择原则 指示剂也有酸成性，指示剂一殷是有机物，酸吸浓度太大有可能 破坏指示剂（少数），而且浓度太高你毎一滴里的检就名，不可能 恰好滴合适的酸砌，总是要多半滴，浓度迪髙差的迪名是根需师需要 的PH值的确定的，其值在Bi选择的指示剂的突迫国。込样溶波才能 圈有顧色的变化，才能够判IS终点 六、 步象 1、吸收曲线的绘制 准确移取10pg/mL铁标准溶液5mL于 50mL容量瓶中,加入10%盐成轻＞1mL, 摇匀，稍冷，加入1 mol/L NaAc潜液5mL和 0.1%邻二負杂菲3mL,以水稀释至刻度，在 分光光度计上，用1cm比色UH,以水力参 比溶蔽，用不同的波长从430 nm开始到 570nm为止,每隔10nm或20nm测定一次 吸光度。然后以波长方横坐标，吸光度力纵 坐标绘制吸收曲线，从吸收曲线上确定该测IIIIIIIIIIII 坐标绘制吸收曲线，从吸收曲线上确定该测 III III III III 定的适宜波长。 2、扶含量的测定* （1 ）标准曲线的绘制：? （1 ）标准曲线的绘制：? 50 mL容量 III III ffi （或比色管）6支，分别移取2mL、4mL、 6mL、8mL,铁标准溶液于5支容量瓶中, 另一容量瓶中不加铁标量溶液（配制空白洛 礼作参比）o然后各1mL10%盐酸羟 股，摇习，经2min后，再各? 5ml 1 mol/LNaAc 落液及3ml 0.1 %邻二氮杂菲，以水吸稀释至 刻度，摇匀。在分光光度计上，用1cm比色 -可修编- -可修编- I,在最大吸收波长(510nm)处，测定各 溶液的吸光度。以铁含量为横坐标，吸光度 力纵坐标，绘制标准曲线。III 力纵坐标，绘制标准曲线。 III (2)未知浪中挟含量的测定：分别二次吸III 10mL未知液代替 标准溶液，其它步骤均同上，测定吸光度。由未利波的吸光度在标海 曲线上査出10mL未如徵中的挟含量，然后以毎毫升未如波中含铁务 少傲克表示结果。 3、绘制吸收曲线 (一)对说定结果进行分析并作出结论：例如从吸收曲线可得出: 邻二氮杂菲亚饮络合物在菠长510nm处眼光H最大，因此湧定时宣 选用的波长为510nm o 1、吸收曲线的绘別 波长nm 吸光度A 570 550 530 520 510 500 490  470 450 430 (2)麻淮曲线的绘制与铁含量的测定 试 桥准溶液的 总含扶量 吸光 液编号 量 V/mL m ( ug) S A 1 0 0 2 2.0 20 3 4.0 40 4 6.0 60 5 8.0 80 6 10.0 100 未 刘浪 七、 未如铁量的洲定 洲的各标液的吸光反，画标准曲线；再根括未知铁液的吸光度， 在麻淮曲线上找出用应的铁量，进而求未加溶波中挟的含量。 八、 分光光度片的便用 分光光度法洲量曲理论依裾是朗伯-比耳定律：当一束単色光通 i