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纸色谱法课程:分析制样技术纸色谱法纸色谱法1、概念纸色谱法又称纸层析法,是一种以滤纸为载体的色谱分离方法。纸色谱法1、概念纸色谱法又称纸层析法,是一种以滤纸为载体的色谱分离方法。对滤纸的一般要求是:(1)质地和厚薄必须均匀,边缘整齐,平整无折痕,无污渍。(2)纸纤维疏松度适当。过于疏松易使斑点扩散,过于紧密则流速慢。(3)有一定的强度,不易断裂。(4)纯度高,不含填充剂,灰分在0.01%以下。否则金属离子杂质会与某些组分结合,影响分离效果。纸色谱法2、纸色谱法的操作过程(1)划线:先将滤纸放在被有机溶剂的蒸气所饱和的容器内,确定起始线及原点,用铅笔在离滤纸一端2~3cm处画一直线。(2)点样:用一支吸取试样的毛细管点在滤纸的原点上,再将滤纸一端浸入有机溶剂中。(3)展开:点样斑点直径为0.2~0.5cm,干燥后再展开。(4)测量:纸色谱法纸色谱法常用比移值Rf来表示某组分在滤纸上的移动情况,其表达式为:比移值最大等于1,此时组比移值最大等于1,此时组分随展开剂一起上升到滤纸前沿;比移值比移值最小等于0,此,此时组分始终留在原点,组分不随展开剂上升而停留在原点。纸色谱法3、纸色谱法的基本原理1、滤纸中的纤维素通常吸收20%。25%的水分,其中约6%的水分子通过氢键与纤维素上的经基结合,在分离过程中不随有机溶剂流动,形成纸色谱中的固定相;2、有机溶剂为流动相,又称展开剂。3、待分离组分在固定相和流动相分配或吸附的差异来进行分离。固定相:不流动吸附的水或其他溶剂纸色谱组分流动相/展开剂:沿着滤纸流动的溶剂或混合溶剂纸色谱法3、纸色谱法的基本原理吸附色谱是靠溶质与吸附剂之间的分子吸附力的差异而分离的方法。吸附力主要是范德华力,有时也可能形成氢键或化学键。吸附法的关键是选择吸附剂和展开剂。常见的展开剂及其极性大小顺序如下:水乙醇丙酮正丁醇乙酸乙酯氯仿乙醚甲苯苯四氯化碳环己烷石油醚纸色谱法4、应用纸色谱法特点: 1)设备简单, 2)操作容易,3)分离效率很高,4)应用很广泛、适于微量分析。总结纸色谱法定义纸色谱法的操作过程纸色谱法的基本原理纸色谱法的应用
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