仪器分析技术偏离朗伯-比尔定律的因素偏离朗伯-比尔定律的因素.doc

偏离朗伯-比尔定律的因素 根据朗伯-比尔定律，当入射光的波长和强度及溶液的液层厚度一定时，吸光度A与待测物质浓度c应成正比,即 A-c 曲线应为一条通过原点的直线。但在实际工作中,A-c 曲线常会出现偏离直线的情况,即偏离 Lambert-Beer 定律。这种偏离将造成所测浓度存在较大的误差。引起偏离 Lambert-Beer 定律的因素主要有化学因素与光学因素。 1.化学因素 溶液浓度或其他因素改变时,溶液中的待测物质可能发生离解、缔合、溶剂化作用等,从而发生偏离 Lambert-Beer 定律的现象。例如,K2Cr2O2 在水溶液中存在如下平衡: Cr2O72-(橙色)+H2O ?2Cr2O42- (黄色)+2H+ 如果逐级稀释配制一组 K2Cr2O 的中性水溶液,在 440mm 处测定各溶液的吸光度,则吸光度A与 K2Cr2O 的浓度c之间不呈线性关系。原因在于,当加水将溶液稀释2倍时,上述平衡向右移动,溶液中 Cr2O72-离子的平衡浓度不是恰好减少为原来的一半,而是减少多于原来的一半，导致了测定结果偏离Lambert-Beer 定律。 有时,通过严格控制实验条件,阻止待测物质的各型体之间相互转化,可以减少或避免由化学因素引起的对 Lambert-Beer定律的偏离。例如,在 1.75mol/LH2SO4 溶液中测定 Cr2O72-或 0.05mol/LKOH 溶液中测定 2Cr2O42-,均可避免上述偏离现象。 2.光学因素 1)非单色光 Lambert-Beer 定律只在入射光为单色光时适用,但实际工作中,光源发射出连续光谱,利用单色器将所需要的波长从连续光谱中分离出来,其波长宽度取决于单色器的狭缝宽度和色散元件的分辨率。由于制作技术的限制,同时为了保证光的强度,狭缝宽度不可能无限小,因此分离出来的光包含了所需波长及附近波长的光。即实际用于测量的入射光是具有一定波长宽度的复合光,其宽度称为谱带宽度( band width)。通常以最大透光强度一半处曲线的宽度来表示单色光的谱带宽度，如图1。 图1 单色光的谱带宽度 由于物质对不同波长的光具有不同的吸收系数，当入射光为具有一定谱带宽度的复合光时，就会发生偏离Lambert-Beer 定律。 （2）杂散光 杂散光系指一些不在人射光谱带范围内的、与所需波长相隔甚远的光。通常来源于仪器光学系统的缺陷或光学元件受灰尘、霉蚀的影响。杂散光的存在亦可导致对Lambert-Beer 定律的偏离,特别是在透光率很弱的情况下,会产生明显的作用。 随着仪器制造工艺的提高,大多数情况下,现代仪器受杂散光的影响已经减小到可以忽略不计。但在接近末端吸收处,杂散光的影响增强,有时会因此而出现假峰。 3)非平行光 Lambert-Beer 定律要求入射光应为平行光。但因仪器性能限制，实际通过吸收池的光往往不是真正的平行光。倾斜光通过吸收池的实际光程比垂直照射的平行光的光程长,相当于增加了液层厚度l而使吸光度增大。这是用不同仪器测量同一物质的吸收系数时产生差异的主要原因之一。 4)反射作用和散射作用 入射光通过吸收池内外界面之间时,界面产生反射作用；入射光通过被测试液时，吸光质点在吸收一定强度光的同时亦可产生散射作用。反射作用和散射作用均导致透射光强度减弱。因此,在紫外-可见分光光度法中,通常将试样溶液和参比溶液分别置于同样质料和厚度的吸收池中，分别测量其透射光的强度，以抵消反射作用和散射作用的影响。但当参比溶液与试样溶液的折射率有较大差异时，反射作用无法完全抵消，可导致吸光度产生偏差；当试液是胶体、乳浊液或含有悬浮物质时，不易制得相应的参比溶液，散射作用不能完全抵消，常使测得的吸光度偏高。