氨基酸发酵工艺培训课程.pptx

25 氨基酸发酵工艺;25.1 概述;25.1 概述;25.1 概述;25.1 概述;25.1 概述;25.1 概述;25.1 概述;25.1 概述;25.1 概述;25.1 概述;（2）添加前体的发酵：通过添加氨基酸的前体或中间产物，以避免生物合成途径中的反馈抑制，如以吲哚为前体，利用麦角菌生产色氨酸。;25.1 概述;25.1 概述;25.1 概述;25.1 概述;反馈调节作用; 野生型菌株酶活性水平的反馈抑制;反馈阻遏与反馈抑制比较;2、解除反馈阻遏、反馈抑制突变株的选育;25.2.1 氨基酸生物合成的调节机制;25.2.1 氨基酸生物合成的调节机制;25.2.1 氨基酸生物合成的调节机制;A;25.2.1.1其他特殊的控制机制 1.多终产物控制 催化分支合成途径共同部分的初始酶，在仅一种氨基酸终产物过剩时，完全不受或微弱或部分地反馈抑制（或阻遏），只是在多数终产物共存下才强烈地控制。有以下几种情况： ;①协同（或多价）反馈抑制： 协同反馈抑制： 指分支代谢途径中的几个末端产物同时过量时才能抑制共同途径中的第一个酶的一种反馈调节方式 ;②合作（或增效）反馈抑制： 系指两种末端产物同时存在时，可以起着比一种末端产物大得多的反馈抑制作用。;③同功酶控制： 同功酶是指能催化相同的生化反应，但酶蛋白分子结构有差异的一类酶，它们虽同存于一个个体或同一组织中，但在生理、免疫和理化特性上却存在着差别。 同功酶的主要功能在于其代谢调节。在一个分支代谢途径中，如果在分支点以前的一个较早的反应是由几个同功酶所催化时，则分支代谢的几个最终产物往往分别对这几个同功酶发生抑制作用而不致过剩;;④积累反馈抑制： 每一分支途径的末端产物按一定百分率单独抑制共同途径中前面的酶，所以当几种末端产物共同存在时，它们的抑制作用是累积的。 ;2、顺序反馈抑制：当E过多时，可抑制C→D，这时由于C的浓度过大而促使反应向F、G方向进行，结果又造成了另一末端产物G浓度的增高。由于G过多就抑制了C→F，结果造成C的浓度进一步增高。C过多又对A→B间的酶发生抑制，从而达到了反馈抑制的效果。这种通过逐步有顺序的方式达到的调节，称为顺序反馈抑制 ;顺序控制：;3.平衡合成：;;25.2 氨基酸发酵的代谢控制与育种;25.2 氨基酸发酵的代谢控制;25.2 氨基酸发酵的代谢控制;25.2 氨基酸发酵的代谢控制;25.2 氨基酸发酵的代谢控制;25.2 氨基酸发酵的代谢控制;25.2 氨基酸发酵的代谢控制;25.2 氨基酸发酵的代谢控制;25.2 氨基酸发酵的代谢控制;25.2 氨基酸发酵的代谢控制;25.2 氨基酸发酵的代谢控制;25.2 氨基酸发酵的代谢控制;25.2 氨基酸发酵的代谢控制与育种;;25.2.3.1解除反馈调节-结构类似物抗性株选育 所谓结构类似物（又称代谢拮抗物）是指那些在结构上和代谢终产物（氨基酸、嘌呤、维生素等）相似的物质。 如：异烟肼（“雷米封”）是吡哆醇的结构类似物，利用含异烟肼梯度平板筛选异烟肼抗性突变株，可达到定向培育吡哆醇高产突变株的目的。 为什么在筛选突变株时,不能直接用代谢产物,而必须用其结构类似物?;25.2.3.2切断支路代谢—营养缺陷型的选育 野生型菌株经诱变剂处理后，由于发生了丧失某种酶合成能力的突变，因而只能在加有该酶合成产物的培养基中才能生长的突变菌株（主要指合成维生素、氨基酸及嘌呤、嘧啶的能力）。 营养缺陷型切断一些相关的代谢流，消除了协同控制机制，可以过量积累特定氨基酸。 利用营养缺陷型菌株生产时，营养缺陷物质的添加量一般在亚适量水平，否则引起反馈抑制。 目前，营养缺陷型和抗结构类似物育种常联合;;O-琥珀酸高丝氨酸;25.2.3.4选育温度敏感突变株 通过诱变，选育出在低温条件下能正常生长，而在高温条件下不能生长的菌株，称为温度敏感突变株。这是因为突变株基因发生转换或颠转，编译的酶对温度敏感，在高温时成为营养缺陷型。;;25.3氨基酸生产工艺;氨基酸的生物合成;25.3.1.1 谷氨酸的生物合成途径与代谢调节; Glu发酵常用菌种 谷氨酸棒杆菌(C.glutamicum) 北京棒杆菌(C.peiking AS.1229) 黄色短杆菌(Brevibacterium flavum) 乳糖发酵短杆菌(B.lactofermentum);1、谷氨酸发酵的代谢途径;CO2固定酶系活力强;乙醛酸循环的作用;2 谷氨酸生物合成的调节机制;优先合成 谷氨酸比天冬氨酸优先合成，谷氨酸合成过量后，就会抑制和阻遏自身的合成途径，使代谢转向合成天冬氨酸