还原糖的测定.pdfVIP

； (1) 提取液的制备 常用的提取剂有水和乙醇溶液， 提取液的制备方法要根据样的性状而定， 但应遵循以下原则： ① 取样量和稀释倍数的确定， 要考虑所采用的分析方法的检测范围。 一般提取经净化和可 能的转化后， 每毫升含糖量应在 0.5~3.5mg 之间， 提取 10 克含糖 2% 的样品可在 100 毫升容 量瓶中进行；而对于含糖较高的食品，可取 5~10 克样品于 250 毫升容量瓶中进行提取。 ②含脂肪的食品，如乳酪， 巧克力，蛋黄酱及蛋白杏仁糖等，通常需经脱脂后再以水进行 提取。一般以石油醚处理一次或几次，必要时可以加热。每次处理后，倾去石油醚层（如分 层不好，可以进行离心分离） ，然后用水提取。 ③ 含大量淀粉和糊精的食品，如粮谷制品，某些蔬菜，调味品，用水提取会使部分淀粉， 糊精溶出，影响测定，同时过滤也困难，为此，宜采用乙醇溶液提取。乙醇溶液的浓度应高 到足以使淀粉和糊精沉淀，通常用 70~75% 的乙醇溶液。若样品含水量较高，混合后的最终 浓度应控制在上述范围内。提取时可加热回流，然后冷却并离心，倾出上清液，如此提取 2~3 次，合并提取液，蒸发除去乙醇。用乙醇溶液作提取剂时，提取液不用除蛋白质，因为 蛋白质不会溶解出来。 ④ 含酒精和二氧化碳的液体样品，通常蒸发至原体积 1/3~1/4 ，以除去酒精和二氧化碳。但 酸性食，在加热前应预先用氢氧化钠调节样品溶液至中性，以防止低聚糖被部分水解。 ⑤ 提取固体样品时， 为提高提取效果， 有时需加热， 加热温度一般控制在。 40~50 ℃， 一般不超过 80 ℃，温度过高时右溶性多糖溶出， 增加下步澄清工作的负担， 用乙 醇 做提取剂，加热时应安装回流装置。 （2 ）提取液的澄清 作为澄清剂必需具备以下几点要求 ：①能较完全地除去干扰物质②不吸附或沉淀被测糖分， 也不改变被测糖分的理化性质③过 剩的澄清剂应不干扰后面的分析操作，易于除掉。 常用三种澄清剂： 中性醋酸铅 [Pb （CHCOO)2?3H2O] 乙酸锌和亚铁氰化钾溶液 硫酸铜和氢氧化钠溶液 澄清剂的用量 样液除铅 2 食品中还原糖的测定 直接滴定法、 3 高锰酸钾法、 4 萨氏法、 5 碘量法 2.1 直接滴定法 (1) 原理 (2) 适用范围 (3) 试剂 (4) 测定方法 (5) 结果计算 ’. ； (6) 说明与讨论 (1) 原理 将一定量的碱性酒石酸铜甲、 乙液等量混合， 立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀， 这种沉淀很 快与酒石酸钾钠反应， 生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。 在加热条件下， 以次甲基 蓝作为指示剂， 用样液滴定， 样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应， 生成红色的氧化亚铜沉 淀，待二价铜全部被还原后，稍过量的还原糖把次甲基蓝还原，溶液由蓝色变为无色， 即为 滴定终点。根据样液消耗量可计算还原糖含量。 (2) 适用范围及特点 本法又称快速法，它是在蓝 - 爱农容量法基础上发展起来的，其特点是试剂用量少，操作和 计算都比较简便、快速，滴定终点明显。适用于各类食品中还原糖的测定。但测定酱油、深 色果汁等样品时，因色素干扰， 滴定终点常常模糊不清， 影响准确性。 本法是国