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PCR 室内质量控制标准操作程序 1．目的： 随时了解并控制实验室检测的精密度变化。 2 ．适用范围： 核酸扩增荧光定量检测实验室。 3 ．负责人： 1 操作人： 1 1 1 4 ．程序： 4 ．1 血清质量控制品制备及操作 4 ．1．1 质控品制备： 收 集 本 室 检 测 的 临 床 样 本 ， HBV DNA 定 量 为 6 10 copies/ml 的样本混匀， 并分装于 0.5ml 的离心管中， 每支 110 μl ，编号后（如 Qb0201-n ），-20 ℃保存。 4 ．1．2 操作： 每次检测过程中将此分装的室内质控品与样本同时检 测，记录此标本的检测结果；计算前 10 次检测结果的平均 值作为本批质控品的靶值。 4 ．1．3 如果使用商品化的质控品，按 4 ．１．２要求执行。 4 ．2 室内质控图的使用方法 4 ．2 ．1 描点 a） 图中 X 线为靶线， X ±2s 为警告线， X ±3s 为失控 线。 对于同一批号的质控血清不论使用几个月，其空图均不 变化。只要将图纸上方“起止日期”项填入每个月的实际起 止日期即可。 b） 每天将该批号质控血清按有关规定程序复融随同病 人的标本同时检测。 将日期、 检测结果和操作者如实记 录在图下方的相应位置， 并按前面的方法画出图上的对 应点，用直线将该点与前一天的点连接。 c ）月底计算当月全部质控血清检测结果的 X 、s 和 CV ， 并进行图形分析和小结， 将质量控制图存入质控资料档 案。 4 ．2 ．2 图形分析 a）如果在 X ±3s 线以外， 则为失控， 应立即报告有关负 责人， 迅速查找原因。 必要时复测标本， 然后方可发出 报告，并将失控情况、 查找过程及处理结果等详细记录。 b）如果在 X ±2s 线以外，或出现连续 6 点以上在一侧 等规律变化， 均应即使向有关负责人反映， 并积极查找 原因。但当天的检验结果一般可以发出。 4 ．2 ．3 通过观察图形的规律性变化进行误差分析，消除误 差来源 a）曲线漂移： 提示有系统误差， 准确度发生了一次性的 向上或向下改变。 这种变化往往是由于一个新的情况引 起的。如更换不同批号试剂，启用新批号的质控血清、 操作人员的变换等。在找原因时，应重点注意“漂移” 前后发生了那些变动的因素。 b ）趋势性变化：向下或向上的趋势性变化表明检测的 准确度发生了渐渐地变化。 这种变化往往是由于一个逐 渐改变的因素造成的。 如质控血清的降解， 试剂效价的 降低等。 c ）连续多点分布在靶值一侧：目前，一般认为质控血 清的检测结果连续 6 天以上 出现在靶值同一侧， 则应迅速查找原因， 争取尽快使之 回复围绕在靶值随机分布的状态。因为按照统计学原 理， 由纯随机误差造成的这种情况的可能性很小。