考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量.docVIP

可修改 欢迎下载 精品 Word 可修改 欢迎下载 精品 Word 可修改 欢迎下载 精品 Word 考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量 实验目的 掌握考马斯亮蓝法测定蛋白质含量的原理和方法。学习分光光度计的原理及使用方法。 实验原理 实验步骤 试剂 试管编号 0 1 2 3 4 5 6 7 标准蛋白质溶液/ml 0.00 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 样品0.1 样品0.1 相当于蛋白质含量/微克 0.00 20 40 60 80 100 未知 未知 蒸馏水/ml 0.1 0.08 0.06 0.04 0.02 0 0 0 考马斯亮蓝染液/ml 3 3 3 3 3 3 3 3 打开分光光度计，预热30min。 取8支洁净的干燥试管，按上表进行编号，0~5号用于标准曲线的绘制，6号、7号用于样品溶液的测定。 取微量注射器，用蒸馏水清洗3次，再用标准蛋白质溶液润洗2次。按上表在0~5号试管中加入标准蛋白质溶液，然后用蒸馏水洗3次，再按上表在0~5号试管中加入相应含量的蒸馏水。 微量注射器用样品润洗2次，抽取100微克的样品加入到6号试管，再抽取100微克加到7号试管。用蒸馏水清洗微量注射器。 取5ml的移液管，用蒸馏水清洗3次，用考马斯亮蓝染液润洗2次。在0~7号试管中各加入3.0ml的考马斯亮蓝染液。振荡试管，混合均匀。 待