蛋白质检测方法.docVIP

可修改 欢迎下载 精品 Word 可修改 欢迎下载 精品 Word 可修改 欢迎下载 精品 Word 蛋白质的检测（参考GB/T6432-94） 一、原理 凯氏定氮法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用浓硫酸破坏有机物，使含氮物转化为硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氮溢出，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白含量。 二、试剂 硫酸 化学纯，含量为98%，无氮； 混合催化剂 0.4g硫酸铜，含5个结晶水，6g硫酸钾或硫酸钠，均为化学纯，磨碎混匀； 氢氧化钠 化学纯，40%水溶液（m/V）； 硼酸 化学纯，2%水溶液（m/V）； 混合指示剂 甲基红0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿0.5%乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为3个月； 盐酸标准溶液 基准无水碳酸钠法标定； 0.1mol/l盐酸标准溶液：8.3mL盐酸注入1000mL蒸馏水中。 0.02mol/l盐酸标准溶液：1.67mL盐酸注入1000mL蒸馏水中。 蔗糖 分析纯； 硫酸铵 分析纯，干燥； 硼酸吸收液 1%硼酸水溶液1000mL，加入0.1%溴甲酚绿乙醇溶液10mL，0.1%甲基红乙醇溶液7mL，4%氢氧化钠水溶液，混合，置阴凉处保存期为1个月（全自动程序用）。 三、仪器设备 实验室用样品粉碎机或研钵； 分样筛 孔径0.45mm（40目）； 分析天平 感重0.00