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- 2021-08-30 发布于江苏
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生物化学实验报告
姓 名:
学 号:
专业年级:
组 别:
生物化学与分子生物学实验教学中心
实验名称蛋白质含量测定——双缩脲试剂法实验日期实验地点合作者指导老师评分教师签名批改日期实验目的
1.1.掌握双缩脲测定血清总蛋白的基本原理、操作;
1.2.掌握双缩脲试剂的配制;
1.3.熟悉血清总蛋白的临床意义;
1.4.了解双缩脲法测定血清总蛋白的特点和注意事项。
二、实验原理
2.1.两分子尿素加热脱氨缩合成的双缩脲(H2N-OC-NH-CO-NH2),因分子内含有两个邻接的肽键,在碱性溶液中可与Cu2+发生双缩脲反应,生成紫红色络合物。
2.2.蛋白质分子含有大量彼此相连的肽键(-CO-NH-),同样能在碱性条件下与Cu2+发生双缩脲反应,生成的紫红色络合物,且在540nm处的吸光度与蛋白质的含量在10~120g/L范围内有良好的线性关系。
三、材料与方法:
3.1.实验材料:
3.1.1.实验试剂:①小牛血清;②6.0mol/LNaOH溶液;③双缩脲试剂:硫酸酮、酒石酸钾钠、碘化钾;④蛋白质标准液(
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