区带电泳实验简便、易行,样品用量少,分离效率高,是分析和分离蛋白质的基本方法。 常用的区带电泳有:纸上电泳,圆盘电泳和板上电泳等。 区带电泳 将惰性的固体或凝胶作为支持物,两端接正、负电极,在其上面进行电泳,从而将电泳速度不同的各组成分分离。 纸上电泳 用滤纸作为支持物的电泳称为纸上电泳。 先将一厚滤纸条在一定pH的缓冲溶液中浸泡,取出后两端夹上电极,在滤纸中央滴少量待测溶液,电泳速度不同的各组分即以不同速度沿纸条运动。 经一段时间后,在纸条上形成距起点不同距离的区带,区带数等于样品中的组分数。将纸条干燥并加热,将蛋白质各组分固定在纸条上,再用适当方法进行分析。 纸上电泳应用 在生物化学中常用电泳法分离和区别各种氨基酸和蛋白质。 在医学中利用血清在纸上的电泳,在纸上可得到不同蛋白质前进的次序,反映了其运动速度,以及从谱带的宽度反映其中不同蛋白质含量的差别。 纸上电泳 健康人和肝硬变患者的血清蛋白电泳图 健康人 肝硬变患者 在外加电场作用下,带电的介质通过多孔膜或半径为1~10 nm的毛细管作定向移动,这种现象称为电渗。 外加电解质对电渗速度影响显著,随着电解质浓度的增加,电渗速度降低,甚至会改变电渗的方向。
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