葡萄糖测定方法.docVIP

可修改 欢迎下载 精品 Word 可修改 欢迎下载 精品 Word 可修改 欢迎下载 精品 Word 葡萄糖测定方法 原理 3,5-二硝基水杨酸（DNS）与还原性糖共热后被还原成棕红色的氨基化合物，该物质在520 nm处有最大吸收峰，且在一定范围内吸收峰的强度（OD值）与还原糖浓度成线性关系，利用比色法可测得样品的含糖量。该方法是半微量定糖法，操作简便，快速，杂质干扰少。 试剂 1）3, 5-二硝基水杨酸试剂（DNS试剂） 甲液：溶解6.9 g苯酚于15.2 mL 10% NaOH中，并稀释至69 mL，在此溶液中加入6.9 乙液：称取255 g酒石酸钾钠，加到300 mL 10% NaOH中，再加入880 mL 1%的3 甲、乙液混合得黄色试剂，贮存于棕色瓶中，室温放置7-10天后备用。 2）0.1%葡萄糖标准液（1 g/L） 准确称取100 mg分析纯的葡萄糖（预先在105℃ 操作步骤 2 mL样品（稀释）+ 1.5 mL DNS → 沸水浴5 min → 流水立即冷却至室温 → 定容至25 mL → 520 nm处检测OD值 浓度范围 0 ~ 0.5 g/L 标准曲线 葡萄糖母液1 g/L：称取1.1 g葡萄糖，溶于1000 反应体系： 试管号 项目 0 1 (0.1 g 2 (0.2 g 3 (0.3 g 4 (0.4 g 5 (0.5 g