蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本制备.docVIP

蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本制备和 不同强度和频率对肌肉收缩的影响 实验摘要 目的：掌握制备具有正常兴奋收缩功能的蛙类坐骨神经腓肠肌标本基本操作以及蛙类手术器械的使用方法。学习微机生物信号采集处理系统和换能器的使用。记录在刺激时间、强度变化率恒定的条件下，不同强度和频率的电刺激对肌肉收缩的影响。 方法：应用蛙类捉拿方法并且毁脑脊髓后制备坐骨神经-腓肠肌标本，用锌铜弓分别刺激坐骨神经和腓肠肌，观察肌肉变化。再利用张力换能器将压力变化转换为电信号，用微机生物信号采集处理系统记录不同强度和频率对肌肉收缩的影响的变化曲线。 结果：用锌铜弓刺激坐骨神经时腓肠肌发生收缩。在保持足够的刺激时间(脉冲波宽)不变的条件下，通过逐步增加对蟾蜍坐骨神经的刺激强度(脉冲振幅)和改变电脉冲刺激频率可发现当电压低于阈值的强度刺激，坐骨神经支配腓肠肌的神经纤维不发生兴奋，刺激电压达到阈强度时，坐骨神经干中阈值最低的神经开始兴奋。刺激强度逐渐增大，总收缩张力增加。当刺激电压达到使支配腓肠肌的神经纤维全部兴奋，则收缩张力达单收缩最大值。 结论：在一定刺激时间下，刚能引起组织发生兴奋的刺激称为阈刺激，所达到的强度为阈强度；能引起组织发生最大兴奋的最小刺激称为最大刺激，相应的刺激强度叫最大刺激强度。介于阈刺激和最大刺激间的刺激称阈上刺激，相应的刺激强度称为阈上刺激强度。 关键词：坐骨神经、腓肠肌、兴奋性、阈值 引言：刺激神经使神经细胞产生兴奋，兴奋沿神经纤维传导，通过神经 肌接头的化学传递，使肌肉终板膜上产生终板电极，终板电极可引起肌肉产生兴奋（即动作电位），传遍整个肌肉纤维，再通过兴奋-收缩耦联使肌纤维中粗、细肌丝产生相对滑动，宏观上表现为肌肉收缩。[1] 材料和方法 实验对象：蟾蜍 实验仪器：张力换能器、微机生物信号采集处理系统、剪刀、铁碗、培养皿、锌铜弓、玻璃分针、大头针、蛙板、尖头镊子、棉线、针形引导电极 实验药品和试剂：任氏液 实验方法： 观察蟾蜍毁脑脊髓前后四肢肌张力的变化。用锌铜弓分别刺激坐骨神经和腓肠肌，观察肌肉的反应。 毁脑脊髓 取蟾蜍一只，用左手握住，以食指压其头部前端使其尽量前俯，右手持探针自枕骨大孔处垂直刺入，到达椎管，即将探针改变方向刺入颅腔，向各侧不断搅动，彻底捣毁脑组织；再将探针原路退出，刺向尾侧，捻动探针使逐渐刺入整个椎管内，捣毁脊髓。此时蟾蜍下颌呼吸运动应消失，四肢松软，即成为一毁脑脊髓的蟾蜍。否则须按上法再行捣毁。 剪除躯干上部及内脏 用粗剪刀在颅骨后方剪断脊柱。左手握住蟾蜍脊柱，右手将粗剪刀沿两侧（避开坐骨神经）剪开腹壁。此时躯干上部及内脏即全部下垂。剪除全部躯干上部及内脏组织，弃于瓷盆内。 剥皮 避开神经，用右手拇指和食指夹住脊柱，左手捏住皮肤边缘，逐步向下牵拉剥离皮肤。拉至大腿时，如阻力较大，可先剥下一侧，再剥另一侧。将全部皮肤剥除后，将标本置于盛有任氏液的培养皿中。 洗净双手和用过的全部手术器械，再进行下列步骤。 分离双腿 避开坐骨神经，用粗剪刀从背侧剪去骶骨，然后沿中线将脊柱剪成左右两半，再从耻骨联合中央剪开（为保证两侧坐骨神经完整，应避免剪时偏向一侧）。将已分离的标本浸入盛有任氏液的培养皿中。 游离坐骨神经 取腿一条，先用剥离分针沿脊柱侧游离坐骨神经腹腔部，然后用大头针将标本背位固定于干净蛙板上。用玻璃分针循股二头肌和半膜肌之间的坐骨神经沟，纵向分离暴露坐骨神经之大腿部分，直至分离至腘窝颈神经分叉处。然后剪断股二头肌腱、半膜肌和半膜肌肌腱，并绕至前方剪断股四头肌腱。自上向下剪断所以坐骨神经分支。将连着3-4节椎骨的坐骨神经分离出来。 完成坐骨神经小腿标本 将已游离的坐骨神经搭在腓肠肌上。用粗剪刀自膝关节周围向上剪除并刮净所以大腿肌肉，在距膝关节约1cm处剪断股骨。弃去上段股骨，保留部分即为坐骨神经小腿标本。 完成坐骨神经腓肠肌标本 用尖子镊子在上述坐骨神经腓肠肌标本的跟腱下方穿孔，穿线结扎之。提起结扎线，在结扎线下方剪断跟腱，并逐步游离腓肠肌至膝关节处，左手握住标本的股骨部分，使已游离的坐骨神经和腓肠肌下垂，右手持粗剪刀水平方向伸进腓肠肌与小腿之间，在膝关节处剪断，与小腿其余部分分离。左手保留部分即为附着于股骨之上的、具有坐骨神经支配的腓肠肌标本。将标本浸入盛有新鲜任氏液的培养皿中待用。 实验系统连接和参数设置 张力换能器的输出端与生物信号采集处理系统的输入通道相连。启动RM6240系统软件，在系统软件窗口设置仪器参数：点击“实验”菜单，选择“刺激强度（或频率）对骨骼肌收缩的影响”项。参数：通道模式为张力，采样频率400 Hz～1 kHz，扫描速度1 s/div，灵敏度10～30 g，时间常数为直流，滤波频率100 Hz。在“选择”下拉菜单中选择