离子交换层析纯化蛋白质的工艺开发.docxVIP

离子交换层析纯化蛋白质的工艺开发 离子交换层析分离蛋白的原理是基于其带电性的不同，通过蛋白质与带电荷的层 析填料之间的静电作用力进行分离 ?ANB Jlfof p H ? Pro pl 0 5 3* * P滞述的髦睜电礴 离子交换箋析整仃质闸*白阳EC ?AN B Jlfof p H ? Pro pl 0 5 3 * * P滞述的髦睜电礴 离子交换箋 析整仃质闸*白阳EC毘商馆合.嚴睹 Vv ..-MJ : HPif IEX有以下三类： 阴离子交换层析(填料带正电荷，与带负电的蛋白质相结合)； 阳离子交换层析(填料带负电，与带正电的蛋白质相结合)。 复合型离子交换(填料配基基团中带有苯环，以离子交换作用为主，同时有一定 的疏水作用力) 理论上来说，只要缓冲液pH值调节合适，所有的蛋白质都可以与阳离子交换柱和阴离子交换 柱结合。但是，蛋白质纯化过程中，选择纯化条件和层析柱类型时最重要的考虑因素就是要保持蛋 白质的稳定，性。因此，选择哪一种离子交换层析和选择什么样的条件会影响蛋白质稳定性和活性是 必须要考量的。 蛋白质与IEX的结合必须采用较宽pH值范围的溶液进行多次尝试以获得最合适的蛋白质保留 pH值o IEX的固定相是由惰性琼脂糖或者高分子基质与带电基团共价结合组成。介质微粒有很多尺 寸，可以无孔，也可以有多种不同尺寸的孔。介质的选择主要根据所需的结合能力、分辨率和流速 要求来决