无菌检查操作规程.docx

精品word学习资料可编辑 名师归纳总结——欢迎下载 目得 无菌检查操作规程 精品word学习资料可编辑 名师归纳总结——欢迎下载 建立无菌检查标准操作规程，确保检查结果精确，牢靠； 使用范畴 本公司无菌产品得无菌检查 职责 质量部 QＣ 依据 ２０ 15 版《中国药典》通就 1101 GＢ／ T 1９973，２－ 2005（ ISO117３7—2：1998). 《疗器械得灭菌 微生物学方法 第 2 部分:确认灭菌过程得无菌试验》 GＢ/T １４ 233，2-2005 《医用输液，输血，注射器具检验方法 第 2 部分:生物学试验方法》 内容 无菌检查环境保证 无菌检査得全部操作均需在严格掌握微生物污染得环境下进行， 即无菌检査应在环境干净度１ 0000 级下得局部干净度 1００级得单向流空气区域内或隔离系统中进行； 操作环境得无菌保证程度将直接影响无菌检查结果 , 为了保证无菌检查用干净室 ( 区) 环境得稳固性 , 确保检查结果得牢靠性 , 对干净室 ( 区) 得环境定期监测并实行合理得措施保证干净环境符合要求 . 无菌检查全过程必需严格遵守无菌操作 , 防止微生物污染 . 干净区得温度，湿度等参数必需符合相应干净级别得要求； 无菌检查操作仍需要对检查环境进行监控， 培育基，稀释液，缓冲液 硫乙醇酸盐流体培育基 ,市售培育基干粉 . 除另有规定 ,接种后应置 30～ 3 ５℃培育． 胰酪大豆胨液体培育基 , 市售培育基干粉；接种后应置 20~35℃培育； 中与或灭活用培育基 , 按上述硫乙醇酸盐流体培育基或胰酪大豆胨液体培 精品word学习资料可编辑 名师归纳总结——欢迎下载 养基得处方及制法， 在培育基灭菌或使用前加入相宜得中与剂， 灭活剂或表面活性剂，其用量同方法适用性试验； 胰酪大豆胨琼脂培育基，市售培育基干粉； 沙氏葡萄糖液体培育基，市售培育基干粉． 沙式葡萄糖琼脂培育基 , 市售培育基干粉 . PH7，0 氯化钠蛋白胨缓冲液 , 市售培育基干粉 . ０，９％无菌氯化钠溶液； 培育基使用性检查 无菌检査用得硫乙醇酸盐流体培育基与胰酪大豆胨液体培育基等应符 培育基得无菌性检査及灵敏度检査得要求 . 本检查可在供试品得无菌检査或与供试品得无菌检査同时进行； 无菌性检查 : 每批培育基随机取５支 ( 瓶) ，按各培育基规定得温度下培育 1４天，应无菌生长 . 灵敏度检查 菌种: 培育基灵敏度检查所用得菌株传代数不得超过５代 ( 从菌种存中心获得得干菌种第 0 代) ，并采纳相宜得菌种保藏技术进行储存，以证试验菌株得生物学特性 ； 金黄色葡萄球菌 [CMCC （B）２ 6 003］ 铜绿假单胞菌 [CMCC （Ｂ )10 104］ 枯草芽孢杆菌 [CＭ CC(B)63 501] 生孢梭菌［ CMCC(B ）６ 4 9４1] 白色念珠菌［ CＭCＣ（ F）９ 8 ００ 1] 黑曲霉［ＣＭ CＣ（ F)98 00３］ 菌液制备 :接种金色葡萄球菌，铜绿假胞菌，枯草芽孢杆菌得培育物至胰酪大豆胨液体培育基中或胰酪大豆胨琼脂培育基上 , 接种生孢梭菌 得培育物至硫乙醇酸盐流体培育基中 , ３ 0. 35℃培育１ 8. 24 小时；接种白色念珠菌得培育物至沙氏葡萄糖液体培育基中或沙氏葡萄糖琼脂 培育基上 , ２0. 25℃培育 24. 48 小时, 上述培育后得新奇培育物用 P Ｈ7，0 无菌化钠—蛋白胨缓冲液或 0，9％无菌化钠溶液制成每 lｍl 菌 精品word学习资料可编辑 名师归纳总结——欢迎下载 数小于 10０ cfｕ( 菌落形成）得菌悬液；接种黑曲霉得培育物至沙氏葡萄糖琼脂面培育基上， 20. 25℃培育 5. 7 天, 加人 3. 5 ml ０，05％ （mｌ/ｍl) 聚山梨酯 80 得 pＨ7，0 无菌化钠—蛋白胨缓冲液或 0，9% 无菌氯化钠溶液 , 将孢子洗脱；然后，采纳相宜得方法吸出孢子悬液至无菌试管内 , 用０， 05％ (ml/ml) 聚山梨醋 8０得 pＨ 7，0 无菌化钠 - 蛋白胨缓冲液或０， 9%无菌氯化钠溶液制成每 lml 孢子数量小于１ 00cfu 得孢子悬液；菌悬液如在室温下放置，应在 2 小时内使用 ; 如储存在 2. 8 ℃在２ 4h 内使用；黑曲霉孢子悬液存在２ . 8℃，在验证过得贮存期内用； 培育基接种 : 取每管装量为 12ｍ l 得硫乙醇酸盐流体培育基 7 支，分别接种小于 100cｆu 得色葡萄球菌， 铜绿假单胞菌， 生孢梭菌各 2 支，另1 支不接种作为空白对比，培育 3 天；取每管装量为９ mｌ得胰酪大豆胨液体培育基 7 支,分别接种小于 1０ 0ｃ fu 得草芽孢杆菌，白色念珠菌，黑曲霉各 2 支,另 1 支不接种作为空白对比，培育 5 天；逐日观看结； 结果判定 :