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(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 107058585 A
(43)申请公布日
2017.08.18
(21)申请号 201710424228.7
(22)申请日 2017.06.07
(71)申请人 浙江殷欣生物技术有限公司
地址 311100 浙江省杭州市余杭经济技术
开发区新颜路22号501D
(72)发明人 黄宝福 章喜超 章晓媛 叶德
王哲
(74)专利代理机构 嘉兴永航专利代理事务所
(普通合伙) 33265
代理人 侯兰玉
(51)Int.Cl.
C12Q 1/68(2006.01)
权利要求书1页 说明书5页
序列表1页 附图1页
(54)发明名称
一种核酸杂交检测方法
(57)摘要
本发明涉及一种核酸检测方法，特别涉及一
种核酸杂交检测方法，属于生物技术领域。本发
明建立了一种新的核酸物质检测方法，通过该方
法的建立扩大核酸检测产品在医疗、科研、食品
安全等领域的使用范围。本发明方法通过基质、
捕获核酸序列、目标核酸、结合核酸序列、检测核
酸序列、微球、信号核酸序列和信号基团实现目
标核酸的捕获和检测。相对于PCR技术需要扩增，
本发明在不增加检测物浓度的前提下实现目标
核酸的检测，且具有稳定性好，成本低，检测速度
快，对环境要求低等优点。
A
5
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8
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0
1
N
C
CN 107058585 A 权 利 要 求 书 1/1 页
1.一种核酸杂交检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤：
（1）根据目标核酸的序列设计捕获核酸序列、结合核酸序列、检测核酸序列和信号核酸
序列，其中捕获核酸序列5’端进行氨基修饰，信号核酸序列5’标记信号基团；
（2）将捕获核酸序列固定到基质上；
（3）将结合核酸序列和检测核酸序列固定到微球上；
（4）通过核酸杂交反应，捕获核酸序列和待测目标核酸结合；
（5）通过核酸杂交反应，固定在微球上的结合核酸序列和待测目标核酸结合；
（6）通过核酸杂交反应，标记了信号基团的信号核酸序列和固定在微球上的检测核酸
序列结合；
（7）通过检测信号基团是否存在来判断待测的样本中是否含有目标核酸。
2.根据权利要求1所述的核酸杂交检测方法，其特征在于：所述的微球是聚苯乙烯
(PS)、交联聚苯乙烯/聚二乙烯基苯 (P[S/DVB]) 、二氧化硅或聚甲基丙烯酸酯(PMMA) 微
球，微球的直径为50-500nm。
3.根据权利要求1所述的核酸杂交检测方法，其特征在于：所述捕获核酸序列和目标核
酸的特定片段互补，且长度在15-50个碱基。
4.根据权利要求1所述的核酸杂交检测方法，其特征在于：所述信号核酸序列和目标核
酸的特定片段互补，且长度在15-50个碱基。
5.根据权利要求1所述的核酸杂交检测方法，其特征在于：所述基质是微孔板、微球、玻
片、硅片或微流体芯片。
6.根据权利要求1或2或5所述的核酸杂交检测方法，其特征在于：步骤（3）中，当基质是
氨基修饰的微孔板则通过戊二醛固定，当基质是羧基修饰的微球时，通过1-乙基-3-（3-二
甲基氨丙基）-碳化二亚胺固定。
7.根据权利要求1或3或4所述的核酸杂交检测方法，其特征在于：捕获核酸序列和信号
核酸序列分别针对目标核酸的不同片段。
8.根据权利要求1所述的核酸杂交检测方法，其特
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