血浆游离核酸提取试剂盒及其应用发明专利.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 107663521 A (43)申请公布日 2018.02.06 (21)申请号 201610617117.3 (22)申请日 2016.07.28 (71)申请人 深圳华大基因股份有限公司 地址 518083 广东省深圳市盐田区洪安三 街21号华大综合园7栋7层-14层 (72)发明人 萧哲　吴宗泽　蔡贤杵　徐快　 黄健　申丹　赵振东　刘娜　 (74)专利代理机构 北京清亦华知识产权代理事 务所(普通合伙) 11201 代理人 李志东 (51)Int.Cl. C12N 15/10(2006.01) 权利要求书2页 说明书14页 附图1页 (54)发明名称 血浆游离核酸提取试剂盒及其应用 (57)摘要 本发明公开了血浆游离核酸提取试剂盒及 其应用，其中，该试剂盒包括：(1)磁珠裂解结合 液，(2)第一清洗液，(3)第二清洗液，(4)洗脱液。 利用本发明的血浆游离核酸提取试剂盒能够快 速提取血浆中的游离脱氧核糖核酸，且其使用快 速简便，无需离心只需半小时就可以完成一次批 量提取，且获得的核酸质量好，用于后续测序和 检测的结果准确可靠，完全适用于现在的无创产 前基因检测技术，在科学研究和临床检测方面都 有重要的意义。 A 1 2 5 3 6 6 7 0 1 N C CN 107663521 A 权　利　要　求　书 1/2页 1.一种血浆游离核酸提取试剂盒，其特征在于，包括： (1)磁珠裂解结合液，包括： 100mM-1M pH 8.1-8.4的Tris-HCl缓冲液； 10mM-500mM的EDTA缓冲液； 0.1％-30％(w/v)的SDS缓冲液； 0.1％-10％(w/v)的柠檬酸钠缓冲液； 1％-50％(w/v)的聚乙二醇溶液； 0.1-10M的异硫氰酸胍溶液；以及 余量的水， 其中，在使用前，需向所述磁珠裂解结合液中添加10-20％(w/v)的异丙醇， (2)第一清洗液，包括： 0.1-10M的异硫氰酸胍溶液； 85mM-1M pH 8.1-8.4的Tris-HCl缓冲液； 10mM-500mM的EDTA缓冲液；以及 余量的水， 其中，在使用前，需向所述第一清洗液中添加20-30％(w/v)的无水乙醇， (3)第二清洗液，包括： 1mM-5M的Trizma Base缓冲液； 1mM-5M的NaCl溶液； 至少0.04％(w/v)的NaN 溶液；以及 3 余量的水， 其中，在使用前，需向所述第二清洗液中添加1-10倍体积的无水乙醇， (4)洗脱液，包括： 1mM-0.5M的Trizma Base缓冲液； 1mM-500mM的EDTA缓冲液；以及 余量的水。 2.根据权利要求1所述的血浆游离核酸提取试剂盒，其特征在于，在所述磁珠裂解结合 液中，Tris-HCl缓冲液的浓度为120mM， 任选地，在所述磁珠裂解结合液中，EDTA缓冲液的浓度为118mM， 任选地，在所述磁珠裂解结合液中，SDS缓冲液的浓度为8.2％(w/v)， 任选地，在所述磁珠裂解结合液中，柠檬酸钠缓冲液的浓度为2.5％(w/v)， 任选地，在所述磁珠裂解结合液中，聚乙二醇溶液的浓度为5％(w/v)， 任选地，在